诊断微生物学新技术

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[美] 汤一苇,查理·斯特顿 著,吴尚为 等 译
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出版社: 科学出版社
ISBN:9787030423566
版次:1
商品编码:11675147
包装:精装
开本:B5
出版时间:2015-04-01
用纸:胶版纸
页数:700
字数:1014
正文语种:中文

具体描述

内容简介

  

  《诊断微生物学新技术》由两个重要部分组成:(1)技术篇;(2)应用篇。第一部分:系统、详细地介绍目前用于临床微生物学检测的各种新技术,包括自动化血培养、快速抗原试验、抗体检测、基于流式细胞仪的抗生素耐药检测技术、实时细胞分析技术、基于脂肪酸的微生物鉴定和药敏试验、基于MALDI-TOF质谱技术的微生物鉴定、各种分子诊断技术如体外核酸扩增技术、PCR及其衍生技术、非PCR靶扩增技术、探针扩增技术、信号扩增技术、实时核酸定量技术、扩增产物检测技术、直接核酸测序技术、芯片技术、基于非放大探针的微生物检测和鉴定、分子分型技术、PCR/电喷雾电离质谱等先进技术的原理、方法和特点,为这些新技术在临床微生物学中的应用提供坚实的技术基础。第二部分:重点介绍上述新技术在临床微生物检验中的应用,包括细菌快速鉴定和药敏试验等。

目录

原著作者寄语
序言一
序言二
序言三
译者的话

第一篇 技术篇
第一章 自动化血培养
第二章 呼气试验检测幽门螺旋杆菌和曲霉菌
第三章 快速抗原检测
第四章 抗体检测的原理及应用
第五章 流式细胞技术在抗生素耐药检测的应用
第六章 以生化反应为基础的微生物鉴定系统
第七章 感染性疾病生物标志物:非抗体依赖性宿主应答
第八章 采用实时细胞功能分析系统进行微生物和病毒感染的功能检测
第九章 基于细胞脂肪酸的微生物鉴定和药敏试验
第十章 MALDI—TOF质谱技术在微生物鉴定中的应用
第十一章 核酸提取技术
第十二章 非扩增核酸探针技术在微生物检测和鉴定中的应用
第十三章 最先进的分子分型技术
第十四章 体外核酸扩增技术
第十五章 PCR及其衍生技术
第十六章 非PCR靶核酸扩增技术
第十七章 探针扩增技术
第十八章 信号扩增技术
第十九章 实时定量核酸分析
第二十章 扩增产物检测技术
第二十一章 凝胶电泳、DNA印迹和微孔板比色系统
第二十二章 直接核苷酸测序鉴定扩增产物
第二十三章 微阵列扩增产物的检测与鉴定
第二十四章 利用荧光淬灭或能量转移机制实时检测扩增产物
第二十五章 电离质谱技术鉴定微生物核酸扩增产物
第二十六章 PCR扩增产物灭活

第二篇 应用篇
第二十七章 通用基因扩增和测序技术在细菌鉴定中的应用
第二十八章 血液和血液制品的分子筛查技术
第二十九章 性传播疾病的分子诊断
第三十章 结核分枝杆菌诊断和耐药性检测新进展
第三十一章 快速筛查和鉴定耐甲氧西林金黄色葡萄球菌
第三十二章 食源性病原体的最新检测方法
第三十三章 床旁即时分子诊断的技术与应用
第三十四章 微生物感染的分子鉴别诊断:多重PCR的方法,应用和技术平台
第三十五章 微生物诊断技术在兽医学领域的进展
第三十六章 兽医诊断病毒学最新进展:来自世界动物卫生组织合作中心的报告
第三十七章 深度测序:技术进展与临床微生物学应用
第三十八章 诊断病毒学中病毒RNA剪接的测定
第三十九章 应用基因芯片检测和鉴定临床重要真菌
第四十章 艰难梭菌的实验室检测技术进展
第四十一章 HIV感染的分子诊断:当前发展状况
第四十二章 微球悬浮阵列法检测和鉴定呼吸道病毒
第四十三章 人乳头状瘤病毒感染的分子诊断与监测
第四十四章 分子检测在脓毒症实验室诊断中的作用
第四十五章 检测新发感染病原体的先进病理学技术
第四十六章 利用宿主和微生物microRNA谱诊断及评价微生物感染
第四十七章 先进技术检测结果的解读和临床相关性

精彩书摘

  《诊断微生物学新技术》:
  二、DNA印迹技术的原理
  DNA印迹技术是用于检测样品中特定DNA序列的分子生物学方法。DNA印迹技术结合了凝胶电泳和探针杂交的方法。片段大小和探针序列被用于决定结果的特异性。根据分子大小在琼脂糖凝胶电泳上分离待测DNA。然后,凝胶上带负电荷的DNA条带被转移到带正电荷的膜上。转移前,有时需要用酸处理DNA凝胶,使大于15 kb的DNA被打断为小片段,使得DNA从凝胶向膜的转印更有效。一些研究也用碱性溶液处理DNA凝胶,碱性环境可以提高带负电荷的DNA结合到带正电荷的膜的效率,同时使DNA变性成单链用于后续的杂交。转印过程是将凝胶放置在缓冲液饱和的滤纸上方,然后将硝酸纤维素膜或尼龙膜放置在凝胶上方(或若用电转移,朝向带正电的方向),最后在膜的上方放一些干滤纸。
  压力需均匀地施加在凝胶上,以确保凝胶和膜之间良好和充分的接触。由于毛细管的虹吸作用,缓冲液通过底部滤纸将凝胶中的变性DNA移动至硝酸纤维素膜或尼龙膜上。这个过程需要几个小时才能完成。DNA条带在膜上的相对位置与凝胶上一致,在分辨率上有最小的损失。之后,将膜放置在真空或普通烤箱中80℃烘烤2h(标准条件,硝酸纤维素膜或尼龙膜)或用紫外线照射(尼龙膜),使转移的DNA永久性地固定在膜上。单链DNA对于硝酸纤维素膜有较强的亲和力,因此放射性或染料标记的探针能够结合到膜上的结合位点。为了防止非特异性结合,用含鲑鱼或鲱鱼精子DNA、浓度各为0.2%的聚蔗糖(蔗糖的人造聚合物,Ficoll)、聚乙烯吡咯烷酮和牛血清白蛋白的溶液处理膜。这种预杂交液也常常用于杂交反应。DNA探针标记一段特定的与待测DNA片段互补的单链DNA片段以检测待测DNA是否存在。将膜与杂交探针一起孵育,探针与互补DNA序列结合,标记的探针显示出特定DNA片段的存在和位置。为了确保探针与样本DNA结合的特异性,最常用的杂交方法采用去离子甲酰胺和去垢剂如SDS来减少探针的非特异性结合。杂交后,用SSC缓冲液洗去膜上的未结合探针,如果采用的是放射性探针或荧光探针,则通过放射自显影的方法在X胶片上显示杂交的情况,如果采用显色的方法,则通过在膜上显色来读取结果。传统的DNA印迹是一个复杂的过程,并不适合快速分子诊断的需要和发展趋势,也没有被用于诊断。但是DNA杂交的技术和原理被用来发展很多现代的技术,如本章后面要介绍的微孔板法和另一章要介绍的基因芯片技术。
  尽管我们这里讨论的凝胶电泳和DNA印迹技术并不是常用的分子诊断技术,但这两个技术被用于发展很多现代分子诊断方法。对临床医生和感染病性疾病专家而言,了解这两项技术的基本原理、操作过程和局限性有助于他们更好地解释检测结果。
  ……

前言/序言


《医学检验技士(士)考试指南:微生物检验》 本书是一本为备考医学检验技士(士)执业资格考试的考生量身打造的复习指导用书。内容涵盖了微生物检验领域的核心知识和技能,旨在帮助考生系统梳理考点,掌握考试要求,顺利通过考试。 第一部分:微生物学基础理论 本部分将深入浅出地介绍微生物学的基本概念和原理,为考生打下坚实的理论基础。 微生物的分类与命名: 详细阐述细菌、真菌、病毒、寄生虫等主要微生物类群的分类系统、命名原则以及它们在医学上的重要性。 微生物的形态与结构: 剖析细菌、真菌、病毒等微生物的细胞结构、超微结构以及不同类型微生物的特有形态特征,如细菌的细胞壁、细胞膜、细胞质、核质体,真菌的菌丝、孢子,病毒的衣壳、核心等。 微生物的生理生化特性: 讲解微生物的营养、代谢、生长繁殖、致病性等基本生理生化活动。重点阐述不同微生物的能量代谢途径、物质转化过程,以及影响微生物生长的环境因素。 微生物的遗传与变异: 介绍微生物的遗传物质(DNA、RNA),基因的结构与功能,以及微生物的遗传变异机制,包括突变、基因重组等,并说明这些变异对微生物学检验和临床实践的意义。 微生物与宿主的相互关系: 探讨微生物与宿主之间的多种关系,包括共生、寄生、机会致病等。重点介绍病原微生物的致病机制,如侵袭、毒素产生、免疫逃避等,以及宿主的免疫应答机制。 消毒与灭菌: 系统介绍各种消毒剂的化学性质、作用原理、选择依据及使用方法。详细讲解物理消毒(如高压蒸汽灭菌、干热灭菌、紫外线消毒)和化学消毒(如酒精、戊二醛、环氧乙烷)的原理、适用范围和注意事项。 第二部分:微生物检验技术与方法 本部分将详细介绍临床微生物实验室常用的检验技术和操作规程,强调实践操作中的细节和要点。 标本的采集、运送与处理: 规范指导各种临床标本(血液、尿液、粪便、痰液、脑脊液、伤口分泌物等)的正确采集方法、保存条件、运送要求以及接收后的初步处理流程,确保标本质量,避免假阳性或假阴性结果。 微生物的分离与培养: 详述各种选择性、鉴别性培养基的配制、性质与用途,以及不同微生物的分离培养方法。重点介绍厌氧菌、真菌、衣原体、支原体等特殊微生物的培养技术。 微生物的显微镜检查: 介绍各种显微镜(光学显微镜、荧光显微镜)的使用方法和注意事项。详细讲解革兰染色、抗酸染色、瑞氏染色等基本染色技术,以及直接涂片镜检在快速诊断中的应用。 微生物的鉴定: 阐述基于形态学、染色性、培养特性、生化反应等方法的微生物鉴定技术。重点介绍API、VITEK等自动化鉴定系统的操作原理与结果判读。 细菌药物敏感性试验(药敏试验): 详细介绍琼脂稀释法、纸片扩散法(Kirby-Bauer法)、微量稀释法等药敏试验的原理、操作步骤、结果判读和MIC(最低抑菌浓度)的意义。强调抗生素耐药性的监测与报告。 血培养与血液标本的微生物检验: 详细讲解血培养的标本采集、培养基选择、培养条件、阳性菌株的复苏与鉴定流程。介绍血培养在早期发现菌血症、败血症中的重要作用。 其他体液标本的微生物检验: 针对尿液、脑脊液、胸腹腔积液、关节液等标本,系统介绍其微生物学检验的流程、常用方法及结果分析。 呼吸道标本的微生物检验: 重点介绍痰液、咽拭子、鼻拭子等标本的采集、处理、培养和鉴定方法,以及常见呼吸道病原体的检测。 胃肠道标本的微生物检验: 详细介绍粪便标本的采集、处理,以及痢疾杆菌、沙门氏菌、霍乱弧菌、轮状病毒等常见肠道病原体的检测方法。 真菌检验: 介绍真菌的形态学特征、培养方法、鉴定技术,以及常见致病真菌(如念珠菌、曲霉菌、隐球菌)的检测。 病毒检验: 简要介绍病毒的基本概念、分类,以及临床常用的病毒检测方法,如抗原检测、抗体检测、核酸检测(PCR),并说明其在诊断中的应用。 寄生虫检验: 介绍常见寄生虫(如蠕虫、原生动物)的形态特征、虫卵识别、检测方法,以及其在消化道寄生虫病诊断中的应用。 第三部分:常见临床微生物感染及检验 本部分将结合临床实际,重点介绍常见临床微生物感染的病原体、临床表现、诊断依据以及相应的微生物学检验方法。 呼吸道感染: 细菌性肺炎、支气管炎、流感、呼吸道合胞病毒感染等。 泌尿生殖系统感染: 尿路感染、淋病、梅毒、生殖器疱疹等。 胃肠道感染: 细菌性痢疾、食物中毒、病毒性肠炎等。 皮肤软组织感染: 疖、痈、蜂窝织炎、丹毒、坏死性筋膜炎等。 血液及淋巴系统感染: 菌血症、败血症、感染性心内膜炎、淋巴结结核等。 中枢神经系统感染: 脑膜炎、脑炎等。 机会性感染: 念珠菌感染、曲霉菌感染、巨细胞病毒感染等。 第四部分:医学微生物学检验质量控制与安全 本部分强调微生物实验室的规范化管理和安全操作,是保证检验质量和实验室安全的重要环节。 微生物实验室的基本要求: 介绍实验室的布局、设备、仪器、人员资质等基本要求。 检验试剂与耗材的管理: 规范试剂的采购、验收、储存、使用和效期管理。 微生物培养基的质量控制: 讲解培养基的制备、灭菌、性能复核等质量控制措施。 室内质量控制(IQC): 介绍各种质量控制方法,如质控菌株的使用、质控品的检测等。 室间质量评价(EQA): 说明参加室间质量评价的重要性及意义。 生物安全防护: 详细介绍生物安全的概念、分级以及实验室人员的防护措施,包括个人防护装备(PPE)、生物安全柜的使用、废弃物的处理等。 实验室的消毒与灭菌: 强调实验室环境、设备、器具的定期消毒灭菌,以及生物危害性物质的正确处理。 第五部分:模拟试题与考点解析 为帮助考生巩固复习成果,本书附有大量模拟试题,涵盖了各章节的重点、难点和易错点。并对部分试题进行详细解析,帮助考生理解出题思路,掌握答题技巧。 本书力求内容全面、条理清晰、重点突出,语言通俗易懂,图文并茂。希望通过本书的学习,广大考生能够掌握医学微生物学检验的核心知识和技能,提高应试能力,为顺利通过医学检验技士(士)执业资格考试奠定坚实的基础。

用户评价

评分

我是一名在基层医院工作的临床检验科医生,我们实验室的设备和技术更新速度相对较慢,但我们非常渴望了解和引入更先进的诊断方法。这本书《诊断微生物学新技术》简直就是我们的一线福音!它非常贴近临床实际需求,详细介绍了如何在有限的资源下,逐步引入和应用新技术。书中对于每种技术的成本效益分析,以及对实验室整体工作流程的优化建议,都非常有参考价值。我特别喜欢其中关于“新技术在基层医疗机构的应用策略”的章节,它为我们提供了切实可行的操作指南,让我不再觉得新技术遥不可及。例如,书中详细介绍了如何根据实验室的实际情况,分步实施自动化微生物鉴定系统,以及如何利用现有的分子诊断平台开展快速病原体筛查。这些内容都解决了我们实际工作中的痛点。这本书让我看到了,即使是在基层,我们也可以通过学习和引进新技术,提升诊断的效率和准确性,从而更好地为患者服务。我真的非常感谢作者能够为我们基层医务人员提供如此有价值的指导,它将极大地促进我们基层微生物诊断水平的提升。

评分

我是一名对生物技术发展充满好奇的普通读者,虽然不是专业人士,但我对“诊断”这个概念及其背后的科学一直很感兴趣。偶然间看到了《诊断微生物学新技术》这本书,虽然名字听起来有些专业,但出于好奇心我还是翻阅了一下。让我惊喜的是,这本书并没有我想象中的那么晦涩难懂。它以一种循序渐进的方式,将原本可能枯燥的科学原理变得生动有趣。我了解到,原来我们每天接触到的疾病,背后都有着精密的微生物诊断技术在支撑。书中的案例分析非常到位,让我能直观地感受到新技术的实际应用价值。比如,它提到的一种快速病原体鉴定技术,能够大大缩短患者的等待时间,这对于病急乱投医的患者来说,是多么重要的福音!作者用了很多比喻和类比,让我在不具备专业背景的情况下,也能理解诸如基因测序、质谱分析等高深的技术。虽然有些专业术语我可能还需要查阅资料,但整体而言,这本书给我打开了一扇了解微生物诊断领域神秘面纱的大门。它让我看到了科学进步如何直接影响到我们的健康福祉,这让我对人类智慧和科技发展充满了敬意。

评分

这本《诊断微生物学新技术》实在太让我惊艳了!我是一名临床微生物实验室的技师,每天都在和各种病原体打交道,对技术的更新迭代尤为敏感。拿到这本书,我真的有种如获至宝的感觉。它系统地梳理了当前诊断微生物学领域最前沿的技术,从传统的培养鉴定方法如何被革新,到分子诊断技术如PCR、二代测序的实际应用,再到新兴的质谱技术、人工智能辅助诊断的潜力,这本书都进行了深入浅出的讲解。尤其让我印象深刻的是,书中不仅罗列了各种新技术,更深入地探讨了它们在临床实践中的优势、局限性以及如何选择最适合特定场景的技术。作者的专业知识毋庸置疑,行文流畅,条理清晰,即使是对于一些非常复杂的技术概念,也能够用易于理解的方式呈现。我尤其喜欢其中关于“实验室自动化与智能化”的章节,它描绘了一个充满未来感的实验室愿景,让我对未来的工作充满了期待。这本书对于任何在微生物诊断领域工作的专业人士来说,都是不可或缺的参考书。它不仅仅是技术的介绍,更是对我们如何更好地服务于临床、提升诊断效率和准确性的一次深刻启迪。

评分

这本书的结构和逻辑性真的非常强。我是一名研究生,正在进行微生物学相关方向的研究,迫切需要了解最新的技术进展来指导我的实验设计。这本书就像一位经验丰富的导师,为我指明了方向。《诊断微生物学新技术》的编排非常合理,从基础的原理介绍,到不同技术的详细阐述,再到临床应用的案例分析,层层递进,环环相扣。让我特别赞赏的是,书中不仅仅是简单地描述技术,更侧重于分析每种技术的优缺点,以及它们在不同临床场景下的适用性,这对于我们科研人员来说至关重要,能够帮助我们避免走弯路。例如,在讨论高通量测序技术时,书中不仅详细介绍了其原理和数据分析方法,还分析了其在耐药性监测、病原体溯源等方面的突出优势,同时也提到了数据解读的挑战和成本问题。这种辩证的分析让我对技术的认识更加全面和深刻。此外,书中引用的参考文献也非常丰富,为我后续的深入研究提供了宝贵的线索。我必须说,这本书的价值远远超过了它的价格,对于任何想要在微生物诊断领域深耕的研究者来说,都是一本不可多得的宝藏。

评分

这本书的图文并茂,让我耳目一新。作为一名医学院的学生,我正在学习临床微生物学,而这本书的出现,让我对这个原本可能有些枯燥的学科产生了浓厚的兴趣。它不仅仅是文字的堆砌,书中插入了大量的精美插图、流程图和表格,将复杂的概念变得直观易懂。我尤其喜欢书中对各种显微影像和分子诊断结果图的解读,它们生动地展示了微生物的形态特征以及诊断技术的原理。比如,在介绍细菌染色法时,书中提供了不同细菌染色后的真实显微图像,让我能够清晰地分辨出不同细菌的形态和染色特性。在介绍PCR扩增时,书中用精美的流程图展示了DNA变性、退火、延伸等关键步骤,让我对整个过程的理解更加深入。此外,书中还穿插了一些历史发展的小故事,让我了解到微生物诊断技术是如何一步步发展至今的,这增加了阅读的趣味性。这本书不仅仅是教材的补充,更像是一本知识的百科全书,让我能够在轻松愉快的阅读体验中,掌握扎实的专业知识。我强烈推荐给所有和我一样的学生,它会让你爱上微生物诊断学。

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