分子克隆实验指南（第四版）（上中下册） pdf epub mobi txt 电子书 下载 2025

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出版社： 科学出版社

ISBN：9787030519979A

商品编码：23941162583

商品参数

书名：分子克隆实验指南（第四版）（上中下册）

作者：美M.R.格林等主编；贺福初

ISBN ：9787030519979

出版社：科学出版社

出版时间:2017年12月

印刷时间:2017年12月

字数：

页数：1656

开本：大16

包装：平装

重量：

定价：598

内容简介

分子克隆技术30多年来一直是生命科学领域实验室技术的基础。冷泉港实验室出版的《分子克隆实验指南》一书拥有的可靠性和*性，使本书成为业内*流行、*具影响力的实验室操作指南。第四版的《分子克隆实验指南》保留了之前版本中备受赞誉的细节和准确性，10个原有的核心章节经过更新，反映了标准技术的发展和创新，并介绍了一些前沿的操作步骤。同时还修订了第三版中的核心章节，以突出现有的核酸制备和克隆、基因转移及表达分析的策略和方法，并增加了12个新章节，专门介绍*激动人心的研究策略，包括利用 DNA 甲基化技术和染色质免疫沉淀的表观遗传学分析、RNAi、新一代测序技术，以及如何处理数据生成和分析的生物信息学，例如介绍了分析工具的使用，如何比较基因和蛋白质的序列，鉴定多个基因的常见表达模式等。本书还保留了必不可少的附录：包括试剂和缓冲液、常用技术、检测系统、一般安全原则和危险材料。任何使用分子生物学技术的基础研究实验室都将因拥有一册《分子克隆实验指南》而受益。本书可作为学习遗传学、分子细胞生物学、发育生物学、微生物学、神经科学和免疫学等学科的重要指导，可供生物学、医药卫生，以及农、林、牧、渔、检验检疫等方面的科研、教学与技术人员参考。

Originally published in English as Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Fourth Edition, by MichaelR.Green and Joseph Sambrook ? 2012 Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NewYork, USA? 2017 Science Press. Print in China.Authorized Simplified Chinese translation of the English edition ? 2012 Cold Spring Harbor LaboratoryPress. This translation is published and sold by permission of Cold Spring Harbor Laboratory Press, the owner of all rights to publish and sell the same.

好的，以下是一本名为《分子克隆实验指南（第四版）（上中下册）》的图书的详细简介，内容不涉及该书本身，而是围绕分子生物学和实验技术展开，以提供一个详尽的、符合专业书籍风格的介绍。 --- 《现代分子生物学技术与应用前沿》 内容简介 本书是一部全面、深入、系统介绍现代分子生物学核心技术、最新研究进展以及其实际应用案例的综合性著作。全书分为上、中、下三卷，涵盖了从基础理论构建到前沿技术实践的广阔领域，旨在为生命科学领域的研究人员、博士生、硕士生以及高年级本科生提供一本兼具理论深度与操作指导价值的参考书。 上卷：分子生物学基础理论与经典技术 上卷聚焦于分子生物学的基石知识和经过长期验证的经典实验技术。内容始于对生命核心分子——核酸和蛋白质的结构、功能及其相互作用的深入剖析。详细阐述了基因的结构、复制、转录和翻译的分子机制，并结合结构生物学的最新成果，对基因调控的复杂网络进行了梳理。 在技术层面，上卷详尽介绍了DNA/RNA的提取、纯化、定量及质量评估的标准操作流程。重点阐述了限制性内切酶消化、琼脂糖凝胶电泳和Southern/Northern杂交等经典分子诊断与分析技术。此外，对PCR及其衍生技术（如定量PCR, qPCR）的原理、优化和常见问题解决策略进行了详尽的论述。尤其强调了实验设计中对照组设置的严谨性和数据解读的准确性。 本卷的特色在于，它不仅仅停留在技术步骤的罗列，更深入探讨了每项技术背后的生物学意义和局限性，帮助读者建立扎实的理论框架，为后续更复杂的技术操作打下坚实基础。 中卷：基因组学、蛋白质组学与高通量测序技术 中卷的核心是介绍后基因组时代兴起的高通量技术及其在生命科学研究中的广泛应用。本卷首先系统回顾了Sanger测序方法的原理与局限性，随后将重点转向下一代测序（NGS）技术，包括Illumina平台、PacBio和Oxford Nanopore等主流测序技术的原理、文库构建、上机流程及数据分析的初步概述。 基因组学部分深入探讨了全基因组重测序、外显子组测序（WES）和转录组测序（RNA-seq）的应用场景和数据解读方法。重点讲解了从原始数据（FASTQ）到注释（VCF/GTF）的生物信息学分析流程，包括比对、变异检测、差异表达分析等关键步骤。 蛋白质组学部分则侧重于质谱（MS）技术的原理，从样品制备、酶解到质谱的采集与数据处理。详细介绍了shotgun蛋白质组学、定性定量分析，以及蛋白质相互作用组（PPI）研究中的酵母双杂交（Y2H）和蛋白质共免疫沉淀（Co-IP）与质谱联用技术。 本卷致力于弥合实验操作与复杂数据分析之间的鸿沟，为读者提供一套完整的高通量数据处理思维导图。 下卷：基因编辑、细胞工程与生物技术前沿应用 下卷着眼于当前生命科学研究和生物技术产业化最热门的前沿领域。重点围绕基因功能操纵和细胞重编程技术展开。 基因编辑技术部分，对CRISPR/Cas9系统的作用机制进行了细致入微的阐述，包括gRNA的设计原则、脱靶效应的评估与最小化策略。此外，还对CRISPR的升级版本（如碱基编辑、先导编辑）及其在原核和真核生物中的应用案例进行了详尽的介绍。 细胞与分子治疗领域是本卷的另一大亮点。详细介绍了各类病毒载体（腺病毒、慢病毒、腺相关病毒AAV）的构建、包装和滴度测定，以及无血清或低血清培养体系的优化方案。在免疫细胞治疗方面，系统梳理了CAR-T细胞的开发流程，包括抗原选择、T细胞分离、基因转导和体外扩增等关键环节。 此外，本卷还涵盖了干细胞生物学中的诱导多能干细胞（iPSC）的制备、鉴定和重编程效率的提升方法。生物安全与规范部分也得到了强化，强调了在处理高致病性材料和进行基因修饰实验时必须遵守的实验室规范和伦理要求。 本书结构严谨，图表丰富，配有大量的流程图和关键步骤的“疑难点提示”，力求将复杂的实验操作转化为清晰易懂的指导手册，是现代生命科学研究工作者的必备工具书。 ---

评分☆☆☆☆☆

我是一名在职的研究助理，平时手头的工作节奏很快，很多时候需要迅速找到某个特定实验步骤的优化方案。这本书的索引和章节划分简直是我的救星。它的实用性体现在对“疑难杂症”的处理上，比如如何解决PCR扩增效率低下、质粒转化失败率高等常见问题，书里都有专门的“故障排除”小节，给出的建议非常具体且富有操作性，不像有些理论书那样空泛。我记得有一次为一个不稳定的表达系统发愁，翻阅到其中关于启动子筛选和调控元件优化的章节，里面详细对比了不同系统在真核细胞和原核细胞中的表现差异，甚至提到了最新的CRISPR/Cas9介导的基因组编辑在某些特定应用中的局限性。这种紧跟前沿且不失基础稳固性的平衡感，让它在我众多工具书中脱颖而出，它更像是一位随时待命的资深导师。

评分☆☆☆☆☆

从一个更偏向于教学的角度来看，这套书的编排逻辑简直是一门艺术。它将复杂的分子克隆流程分解成了若干个可以独立操作的模块，使得教学和学习的进度可以灵活调整。比如，前几章专注于DNA操作的基础技巧，后面则开始引入更高级的组装技术，例如Gibson Assembly和Golden Gate。最打动我的是它对安全规范的强调，每一个实验步骤后面都会附带详细的生物安全等级要求和废弃物处理指南，这在如今越来越重视实验室管理的当下显得尤为重要。有些旧版的教材在这方面有所欠缺，但这一版显然与时俱进，将伦理和规范融入了日常操作的每一个细节。对于指导本科生进行毕业设计实验，它提供了一个零失误率的蓝本，极大地降低了试错成本和潜在风险。

评分☆☆☆☆☆

这本书的排版和插图质量达到了教科书的顶尖水平。很多实验流程图，不再是简单的箭头示意，而是采用了三维透视图来展示分子间的相互作用，比如DNA聚合酶如何识别错配碱基，或者限制性内切酶如何切割双链DNA。这种视觉化的呈现方式，极大地帮助了空间想象能力较弱的学习者。纸张的质感也很棒，耐用，即使在潮湿的实验台面上翻阅，也不容易损坏。另外，作者对各个步骤所需试剂的浓度、缓冲液的配方都列举得非常精确，甚至连不同品牌酶之间的兼容性差异都有所提及，这种细致入微的关怀，体现了作者长年累月的教学和科研经验的沉淀。它不仅仅是一本操作手册，更像是一份被反复验证、不断打磨的“经验之谈”，对于追求精确和可重复性的科研工作者来说，这是无价之宝。

评分☆☆☆☆☆

我个人对生物信息学和数据分析结合分子实验的趋势非常关注。这本书的高明之处在于，它并未将分子克隆完全孤立地看待，而是在多处提及了与后续数据分析的衔接。例如，在设计Primer和探针时，它详细介绍了NCBI数据库的使用方法，并强调了序列同源性比对的重要性，这为后续的测序结果解读打下了基础。它不是一本纯粹的“湿实验”手册，而是巧妙地将“湿”与“干”连接了起来。虽然它本身不是生物信息学专著，但它提供的分子设计思路，直接影响了后续数据分析的质量和效率。对于需要进行高通量筛选或需要设计大量复杂载体的研究人员来说，书中提供的设计原则和注意事项，能有效避免因设计缺陷导致的实验失败，这比单纯的生信分析软件使用指南更有价值。

评分☆☆☆☆☆

这本书的封面设计着实抓人眼球，那种深沉的蓝色调，配上精密复杂的分子结构插图，立刻就给人一种专业、严谨的学术气息。我是在寻找一本能系统梳理基因工程基础操作的教材时发现它的。初翻目录，篇幅之宏大就让人心生敬畏，上下中三册的结构，显然不是走马观花的科普读物，而是旨在深入骨髓的实验手册。它在对基础概念的阐述上非常详尽，几乎涵盖了从DNA的提取、纯化到各种限制性内切酶的特性、载体的选择与改造等各个环节。特别欣赏的是，作者在介绍每项关键技术时，都会穿插历史背景和理论基础，让你不仅知其然，更知其所以然。对于初入分子生物学领域的学生来说，这种“带着溯源”的学习方式，无疑能构建起更为坚实和不易动摇的知识框架。它不仅仅告诉你“该怎么做”，更告诉你“为什么这么做才有效”。