核酸提取与纯化实验指南 pdf epub mobi txt 电子书 下载 2025

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马文丽，石嵘 编

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• 核酸提取
• 核酸纯化
• 分子生物学
• 生物化学
• 实验指南
• 生物技术
• DNA提取
• RNA提取
• 实验室技术
• 科研方法

出版社： 化学工业出版社

ISBN：9787122147516

版次：1

商品编码：11082125

包装：平装

丛书名： 生物实验室系列

开本：16开

出版时间：2012-01-01

页数：153

内容简介

核酸是遗传信息的携带者，是基因表达的物质基础，是分子生物学研究的主要对象。无论是进行核酸的结构还是功能研究，首先都需要对核酸进行提取和纯化。
《核酸提取与纯化实验指南》根据近几年核酸提取与纯化技术的发展现状组织编写，内容涵盖动物、植物、细菌、病毒和其他核酸提取与纯化技术。全书内容新、技术全、操作性强，具有较好的可读性、实用性。
《核酸提取与纯化实验指南》可供遗传学、分子生物学、医学基础等专业的研究生、高年级本科生以及相关研究人员阅读参考。

目录

第一章 概述
第一节 核酸提取与纯化的历史
第二节 核酸提取与纯化的现状
一、当前核酸提取与纯化的应用领域
二、当前核酸提取与纯化的常见方法
三、核酸提取与纯化存在的问题和解决方法
参考文献
第二章 动物核酸的提取与纯化
第一节 概述
第二节 动物基因组DNA的提取与纯化
一、动物组织材料的预处理
二、DNA提取的预处理
三、DNA提取的方法
四、DNA的纯化方法
五、DNA的检测和鉴定
第三节 动物RNA的提取与纯化
一、动物总RNA的提取与纯化
二、动物mRNA的提取与纯化
三、动物microRNA的提取与纯化
参考文献
第三章 植物核酸的提取与纯化
第一节 概述
一、应用于重要农艺性状功能基因的分离
二、应用于农业基因组学
三、应用于植物转基因技术及其改良品种
四、应用于植物染色体工程技术
五、应用于植物次生代谢产物的生产
六、应用于植物DNA分子标记辅助育种
七、应用于转基因食品的检测
第二节 植物基因组DNA的提取与纯化
一、植物组织材料的预处理
二、植物基因组DNA的提取
三、植物基因组DNA的纯化
四、植物基因组DNA的检测
第三节 植物RNA的提取与纯化
一、植物总RNA的提取与纯化
二、植物mRNA的提取与纯化
三、植物microRNA的提取与纯化
四、植物RNA的检测
参考文献
第四章 细菌核酸的提取与纯化
第一节 概述
第二节 细菌基因组DNA的提取与纯化
一、细菌基因组DNA小量制备
二、氯化铯法大规模制备细菌基因组DNA
三、细菌基因组DNA提取试剂盒(溶液法)
四、提取基因组DNA注意事项
五、基因组DNA鉴定
六、DNA的纯化
第三节 细菌RNA的提取与纯化
一、从革兰氏阴性细菌中分离高质量的RNA
二、从革兰氏阳性细菌分离RNA
三、从革兰氏阴性细菌中快速分离RNA
四、细菌RNA提取试剂盒
参考文献
第五章 病毒核酸的提取与纯化
第一节 概述
一、病毒的大小和形态
二、病毒的结构及化学组成
三、病毒的分类
四、病毒的复制过程
五、病毒纯度的标准
六、病毒提纯的一般原则
七、病毒核酸的应用领域和提取方法指导
第二节 病毒DNA的提取与纯化
一、病毒DNA单链及双链特点
二、具体的实验方法
三、检测和鉴定
第三节 病毒RNA的提取与纯化
一、病毒RNA的提取
二、具体的实验方法
三、检测和鉴定(电泳鉴定)
参考文献
第六章 其他核酸的提取与纯化
第一节 线粒体DNA与叶绿体DNA的提取与纯化
一、线粒体DNA的提取与纯化
二、叶绿体DNA的提取与纯化
第二节 质粒DNA的提取与纯化
一、质粒DNA的小量提取与纯化
二、质粒DNA的大量提取与纯化
第三节 DNA片段的提取与纯化
一、酶切片段的提取和纯化
二、小片段DNA的提取和纯化：PCR产物等的提取纯化
三、cDNA的提取和纯化
四、带特殊标记的DNA的提取和纯化
第四节 其他RNA的提取与纯化
一、核糖体RNA的提取与纯化
二、RNA探针的提取和纯化
参考文献

前言/序言

序言
２１世纪是生命科学的世纪，这已成为人们的共识。
生命科学随着人类对自身和自然的认识、探索而萌芽，随着人类生产和科学实践的进步而发展。现代生命科学包括生物学、医学、农学等传统学科领域，以及生物学、生物技术与环境科学乃至社会科学等其他学科相互渗透、交叉而产生的新型学科体系。20世纪后叶，现代生物科学尤其是分子生物学取得了一系列突破性成就，使得生命科学在自然科学体系中的位置发生了革命性的变化，成为21世纪的带头学科。人们对生命科学也寄予了无限的期望，希望能够解决人类社会所面临的人口膨胀、资源匮乏、疾病危害、环境污染和生态破坏等一系列重大问题。
回顾生命科学的发展历程，实验技术一直起着非常重要的促进作用。如17世纪Ｌｅｅｕｗｅｎｈｏｅｋ等人发明并应用显微镜技术，直接催生了“细胞学说”的建立和发展；1973年Ｃｏｈｎ和Ｂｏｙｅｒ完成了ＤＮＡ体外重组实验，标志着基因工程的肇始；1988年ＫａｒｙＭｕｌｌｉｓ发明的ＰＣＲ技术甚至使生命科学产生了飞跃性的发展。可以说，生命科学每时每刻离不开实验，实验是开启神奇的生命王国大门的钥匙。没有实验技术的不断进步，也就没有生命科学今天的巨大发展；同时，生命科学的发展又对实验技术提出了更高的要求，进一步刺激了后者的不断进步。生命科学正是在“实验催生和验证着基础理论，理论指导和发展了实验技术”的不断循环中从必然王国走向自由王国。
工欲善其事，必先利其器。为了有助于生命科学工作者更多地了解相关实验技术和仪器设备，更好地设计实验方案，更有效地开展实验过程，更合理地处理实验结果，化学工业出版社组织出版了《生物实验室系列》图书。系列图书在整体规划的基础上，本着“经典、前沿、实用，理论与技术并重”的原则组织编写，分批出版。
在题材上，系列图书涵盖综合实验技术和单项实验技术两个方面。其中综合实验技术既有以实验目的为题，如“蛋白质化学分析技术”，内容纵向覆盖多项实验技术；也有以某一生命学科领域的综合实验技术为题，如“发酵工程实验技术”、“生物化学实验技术”等。而单项实验技术则以深入介绍某一专项技术及其应用为主，在阐述其基本原理的基础上，横向介绍该项技术在多个领域的应用，如“双向电泳技术”、“流式细胞术”等。
在内容上，系列图书主要有以下两个显著特点。一是强调先进性——除了系统介绍常用和经典实验技术以外，特别突出了当前该领域实验手段的新理论、新技术、新发展，为国内专业人员起到借鉴和引导作用。二是强调可操作性——对于每一项实验技术，系统介绍其原理方法、设备仪器和实验过程，让读者明了实验的目的、方案设计以及具体步骤和结果处理，以期起到实验指南的作用。
本系列图书坚持质量为先，开拓国内和国际两个出版资源。一方面，邀请国内相关领域兼具理论造诣和丰富实验室工作经验的专家学者编著；另一方面，时刻关注国际生命科学前沿领域和先进技术的进展，及时引进（翻译或影印）国外知名出版社的权威力作。
《生物实验室系列》图书的读者对象设定为国内从事生命科学及生物技术和相关领域（如医学、药学、农学）的专业研究人员，企业或公司的生产、研发、管理技术人员，以及高校相关专业的教师、研究生等。
我们殷切希望《生物实验室系列》图书的出版能够服务于我国生命科学的发展需要，同时热忱欢迎从事和关心生命科学的广大科技人员不仅对已出版图书提供宝贵意见和建议，也能对系列图书的后续题目设计贡献良策或推荐作者，以便我们能够集思广益，将这一系列图书沿着可持续发展的方向不断丰富品种，推陈出新。
谨向所有关心和热爱生命科学，为生命科学的发展孜孜以求的科学工作者致以崇高的敬意！
祝愿我国的科技事业如生命之树根深叶茂，欣欣向荣！
化学工业出版社生物·医药出版分社

生物技术前沿：现代分子生物学技术与应用 书籍简介 本书旨在为分子生物学领域的研究人员、技术人员以及高年级本科生和研究生提供一本全面、深入且极具实践指导意义的参考书。不同于侧重单一实验步骤的指南，本书构建了一个涵盖分子生物学核心技术体系的宏大框架，重点聚焦于技术原理的深入解析、最新方法的迭代发展，以及复杂实验设计与数据解读的综合策略。 本书内容紧密围绕分子生物学的基石——核酸、蛋白质及其相互作用的研究展开，系统性地介绍了从样本制备到高级功能研究的全流程技术链条。 --- 第一部分：分子生物学基础与样本制备的艺术 本部分奠定了后续所有实验操作的物质基础，强调了样本质量对实验结果的决定性影响。 第一章：分子生物学研究的伦理与安全规范 详细阐述了实验室生物安全等级（BSL）标准，化学试剂的正确处理与废弃流程，以及基因操作的生物安全考量。重点解析了现代实验室管理体系中对数据完整性和可追溯性的要求。 第二章：生物大分子样本的采集、稳定与预处理 深入探讨了不同组织来源（植物、动物、微生物）的样本采集时机、保存介质（如RNAlater、不同浓度的福尔马林）的选择标准及其对后续分子完整性的影响。详细对比了快速冷冻法、液氮研磨法、匀浆法等多种组织匀浆技术，并分析了不同方法对细胞器膜结构破坏程度的差异，这直接关系到后续提取的效率和纯度。 第三章：高效分离与初步纯化技术精要 这一章聚焦于宏观的分离技术，而非微观的提取过程。涵盖了差速离心法在分离细胞器（如线粒体、核）中的应用，密度梯度离心（如Percoll或蔗糖梯度）用于亚细胞组分的精确分离。此外，还包括了对特定组织或细胞群进行富集的流式细胞术（FACS）的基础原理及其在下游分析前的样本预处理要求。 --- 第二部分：基因组学与转录组学的核心技术链条 本部分聚焦于DNA和RNA的检测、扩增、定量及测序准备，是现代生命科学研究的支柱。 第四章：核酸分析与定量：超越传统方法的限制 本书对传统琼脂糖凝胶电泳的原理进行了详尽的物理化学阐释，并深入分析了影响迁移速度的电场强度、缓冲液离子强度和分子构象（线性、环状、超螺旋）的相互作用。着重介绍了高灵敏度的荧光定量分析技术（如NanoDrop与Qubit平台），并详细对比了它们在测定核酸纯度（A260/A280, A260/A230比值）和绝对浓度时的适用场景与局限性。 第五章：聚合酶链式反应（PCR）的深度优化与变体 不仅复述了标准PCR的步骤，更侧重于高级PCR技术的精确控制。详细讲解了实时荧光定量PCR（qPCR）中各种检测模式（TaqMan探针、SYBR Green）的荧光信号产生机制、溶解曲线分析在区分特异性产物中的作用，以及如何通过熔解曲线分析来排除引物二聚体。对高保真DNA聚合酶的结构特性和应用限制进行了深入讨论。 第六章：下一代测序（NGS）文库构建的精密工程 本章是本书的重点之一，全面覆盖了从DNA/cDNA片段化到接头连接的整个文库制备流程。详细分析了不同片段化技术（酶切法、超声波破碎法）对片段大小分布的影响。对于RNA测序，区分了基于Poly(A)富集、核糖体RNA去除和全长RNA测序在文库设计上的核心差异，并强调了去除PCR偏好性、优化PCR循环数以减少GC偏倚的策略。 第七章：分子克隆学：载体设计与高效转化 深入探讨了质粒载体的拓扑结构、抗性标记、复制起点（Ori）的选择对细胞宿主筛选的影响。详细对比了限制性内切酶“粘性末端”与“平末端”操作的技术要点，以及使用Gibson Assembly、SLIC等无缝克隆技术时的缓冲区优化要求。着重介绍了不同宿主细胞（大肠杆菌、酵母、哺乳动物细胞）的高效转化（感受态制备与电穿孔参数设置）的技术诀窍。 --- 第三部分：蛋白质组学与功能分析的技术前沿 本书将视角从核酸扩展到蛋白质层面，探讨如何解析生命体的分子执行者。 第八章：蛋白质的分离与分离基础 系统介绍了SDS-PAGE和非变性PAGE的电泳原理，重点分析了变性剂（SDS、尿素）和还原剂（DTT、β-巯基乙醇）浓度对蛋白质二级结构解析的影响。对于2D-PAGE，详细阐述了等电聚焦（IEF）的pH梯度设置与蛋白质迁移的等电点关系。 第九章：免疫学检测技术的深度应用 详细讲解了Western Blotting中的抗体选择、一抗二抗孵育条件的优化（如稀释度、封闭液的种类选择），以及化学发光与荧光检测系统的灵敏度对比。此外，还收录了ELISA（酶联免疫吸附测定）在定量分析中的曲线拟合方法与质量控制（QC）标准。 第十营：蛋白质相互作用组（PPI）的研究方法 本书不局限于传统的双击合实验（Y2H），而是深入探讨了体内共免疫沉淀（Co-IP）的条件优化，如选择合适的温和洗脱缓冲液以维持弱相互作用。对于体内实验，则详细介绍了报告基因检测系统（如Luciferase Reporter Assay）的定量校准流程。 第十一章：细胞内定位与分子成像技术 聚焦于如何利用荧光标记技术确定蛋白质的亚细胞定位。详细介绍了绿色荧光蛋白（GFP）及其变体的光稳定性、成熟时间等特性。讲解了共聚焦显微镜的关键参数设置（如针孔大小、Z轴扫描），以有效减少焦平面外信号的干扰，实现高分辨率的三维重构。 --- 第四部分：实验数据的分析、整合与高级策略 本书强调，实验的终点是数据，而数据的意义依赖于正确的解读。 第十二章：生物信息学初步：从原始数据到结果可视化 本章为分子生物学研究者提供了必要的数据处理工具箱。介绍了常用的序列比对工具（如BLAST）的参数设置意义，基因表达数据（如RNA-seq）的标准分析流程（包括质量控制、比对、定量及差异表达分析的基础概念）。强调了统计学在生物学实验中的重要性，如t检验、ANOVA的应用边界及多重检验校正方法（如FDR）。 第十三章：复杂实验设计与系统性故障排除 提供了一套系统的实验设计思维框架，教授读者如何构建有效的对照组（阴性、阳性、试剂对照），以及如何进行预实验以确定最佳的反应体系。书中收集了数百个常见实验失败案例，并从“试剂”、“设备”、“操作”三个维度进行系统性的故障排查指导，如“为什么我的PCR扩增效率低？”、“为什么我的蛋白质印迹背景过高？”等实际问题。 本书力求成为分子生物学领域研究人员手中一部兼具理论深度与操作实用的“技术宝典”，是实现高水平科研产出的坚实技术保障。

评分☆☆☆☆☆

我对这本书的评价是，它就像一本“百科全书”式的实验指导，能够满足不同水平读者的需求。我是一位刚刚接触分子生物学领域的医学研究者，在学习过程中，我经常会遇到一些概念性的问题，比如为什么需要裂解细胞，为什么要加入结合缓冲液，为什么要用洗涤液等。《核酸提取与纯化实验指南》这本书就很好地解答了我的这些疑惑。它在前言部分就对核酸的性质、提取的目的以及纯化的重要性做了非常详细的阐述，为我打下了坚实的理论基础。书中在介绍每种提取方法时，都会详细解释所用试剂的作用机理，以及每一步操作的科学依据。例如，在使用硅胶膜吸附法提取核酸时，书中会详细讲解在高盐浓度和特定 pH 条件下，核酸如何与硅胶膜结合，以及在低盐或无盐条件下如何洗脱。这种深入的原理讲解，让我能够更好地理解实验过程，而不是仅仅机械地模仿步骤。而且，书中还提供了很多实际案例，展示了如何根据不同的研究目的（比如基因分型、基因表达分析、文库构建等）来优化核酸提取纯化方案，这对我后续的研究设计非常有启发。

评分☆☆☆☆☆

作为一名刚刚入门分子生物学实验的研究助理，我一直在寻找一本能够清晰、系统地指导我完成核酸提取与纯化这一基础却至关重要的实验的书籍。经过一番比较，我最终选择了《核酸提取与纯化实验指南》。这本书简直是我的“救星”！它以极其详尽的步骤，从理论基础到实际操作，面面俱到。比如，书中对于不同样本类型（如血液、组织、细胞、植物等）的核酸提取方法都进行了深入的介绍，并且详细阐述了每种方法的原理，例如有机溶剂法、柱层析法、磁珠法等，并分析了它们的优缺点。对于我这样初学者来说，理解这些原理至关重要，能够帮助我根据实验需求选择最合适的方法。此外，书中对实验过程中可能遇到的各种问题，如产量低、纯度不高、降解等，都提供了非常实用的故障排除指南，并给出了具体的解决方案。让我印象深刻的是，书中对于试剂的配制、仪器的选择和使用，甚至是实验室安全注意事项，都做了细致的说明，几乎可以说是手把手教学。我还特别喜欢书中附带的大量图示和流程图，这使得复杂的实验步骤变得直观易懂，极大地提高了我的学习效率，让我能够信心满满地投入到实际操作中。

评分☆☆☆☆☆

我是一名实验室的管理员，负责管理实验室的试剂和耗材，同时也需要协助进行一些基础的实验操作。对于《核酸提取与纯化实验指南》这本书，我更多的是从实用和标准化的角度去审视它。这本书最大的优点在于它的全面性和规范性。它包含了市面上主流的核酸提取和纯化方法，并且对每种方法的试剂用量、反应时间、离心速度等关键参数都给出了明确的建议范围。这对于我们建立标准化的实验流程非常有帮助。当有新成员加入实验室需要进行核酸提取实验时，我可以直接将这本书作为教材，因为它提供了非常清晰的操作 SOP（标准操作规程）。书中的一些表格，比如不同类型样本的核酸提取效率对比，以及常见核酸酶的性质和抑制剂，都为我们选择最经济高效的实验方案提供了依据。另外，书中还针对不同纯化产品的说明书，进行了详细的解读和比较，这能帮助我们更好地理解和使用各种商品化的试剂盒，避免因误读说明书而造成的实验失败。这本书的出版，极大地降低了我们在核酸提取纯化实验中的操作门槛，也确保了实验结果的可靠性。

评分☆☆☆☆☆

我是一位从事多年生物技术研发的资深研究员，在我的职业生涯中，接触过各种各样的核酸提取和纯化技术。《核酸提取与纯化实验指南》这本书，对于我来说，更多的是一种“查漏补缺”和“巩固深化”的作用。我发现这本书在一些非常细微之处的处理上，做得相当到位。比如，在讨论不同裂解液的配方时，书中会详细分析各种添加剂（如 SDS、胍盐、DTT 等）的具体作用，以及它们如何协同作用来达到最佳的裂解效果。对于一些常被忽视的细节，比如离心管的选择、缓冲液的储存条件、甚至是操作环境的温度控制，书中都给予了充分的提示。这说明作者在编写过程中，对实验的每一个环节都进行了深入的思考。另外，书中还对一些新兴的核酸提取技术，比如基于微流控技术的提取方法，也有所提及，这让我能够及时了解行业的前沿动态。总的来说，这本书不仅仅是为初学者量身定做的，对于经验丰富的研究者来说，它也是一本值得反复研读的宝典，能够帮助我们不断提升实验的精密度和效率，从而推动科研成果的产出。

评分☆☆☆☆☆

我是一名在读的博士生，之前做实验基本都是跟着师兄师姐留下的笔记，虽然也能勉强进行，但总觉得缺乏系统性，而且对一些细节的理解不够深入。拿到《核酸提取与纯化实验指南》这本书后，我发现它完全超出了我的预期。这本书不仅仅是告诉你“怎么做”，更重要的是它深入浅出地解释了“为什么这么做”。例如，在讨论酚氯仿抽提法时，它不仅给出了详细的步骤，还详细解释了酚和氯仿如何溶解脂质和蛋白质，以及如何通过离心分离出核酸。对于RNA提取中的DEPC水处理，书中也给出了充分的理由和必要性。更让我惊喜的是，这本书还涉及了一些高级的应用，比如如何在提取过程中避免内源性核酸酶的降解，以及如何处理一些特殊的样本，比如土壤样本或粪便样本，这些在我的日常实验中虽然不常用，但了解它们有助于拓宽我的实验视野。这本书的语言严谨又不失生动，即使是一些比较枯燥的原理，读起来也不会觉得乏味。总的来说，这本书不仅能够满足我作为一名科研人员在核酸提取纯化方面的基本需求，更能帮助我提升实验的深度和广度，让我在研究中更加游刃有余。

评分☆☆☆☆☆

实验指导书，做参考，一般

评分☆☆☆☆☆

太太专业的生物学实验室指南。

评分☆☆☆☆☆

实验指导书，做参考，一般

评分☆☆☆☆☆

实验指导书，做参考，一般

评分☆☆☆☆☆

正版

评分☆☆☆☆☆

买了之后才感到后悔了，书价钱很贵，但是质量一般，还不如买一本分子克隆呢

评分☆☆☆☆☆

太太专业的生物学实验室指南。

评分☆☆☆☆☆

正版

评分☆☆☆☆☆

实验指导书，做参考，一般