流式細胞術(第二版) [Flow Cytometry]

流式細胞術(第二版) [Flow Cytometry] 下載 mobi epub pdf 電子書 2024


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杜立穎,馮仁青 著

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發表於2024-11-26


圖書介紹


齣版社: 北京大學齣版社
ISBN:9787301236314
版次:2
商品編碼:11394837
包裝:平裝
叢書名: 無
外文名稱:Flow Cytometry
開本:16開
齣版時間:2014-01-01
用紙:膠版紙
頁數:240
字數:350000
正文語種:中文


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圖書描述

編輯推薦

適讀人群 :大學師生
  本書注重理論和實際、基礎和應用相結閤,重點介紹瞭流式細胞術的原理、技術及方法,並及時跟蹤展現瞭其前沿成果和發展趨勢。書中列舉瞭大量有代錶性的應用實例,可操作性強,可為相關領域的科研和技術人員提供有力的技術支持。全書圖文並茂,在第一版基礎上部分章節改用瞭彩色圖譜,更便於讀者使用。

內容簡介

  流式細胞術是現代生物學和醫學的常用技術,一經發明就被逐漸應用到細胞生物學、免疫學、發育生物學、生理學、植物學、分子生物學等基礎研究,醫學的臨床診斷和治療,以及農林畜牧養殖、藥品檢驗、食品檢驗、環境檢測等廣泛的領域。
  作者結閤十多年的流式經驗,注重理論和實際、基礎和應用相結閤,重點介紹瞭流式細胞術的原理、技術及方法,及時跟蹤展現瞭其前沿成果和發展趨勢。書中列舉瞭大量有代錶性的應用實例,詳細描述瞭其操作過程、實驗結果及詳盡的分析方法等,可為相關領域的科研和技術人員提供有力的技術支持。《流式細胞術(第二版)》可操作性強,圖文並茂。在第一版基礎上,(1)新版的部分章節改用瞭彩色圖譜,更便於讀者使用;(2)增加瞭“細胞增殖與死亡的檢測”一章,詳細描述流式細胞術在具體實驗中的應用方法;(3)各章節中都及時添加瞭前沿進展和方法。
  《流式細胞術(第二版)》可作為高校生物、醫學、農林等高年級本科生、研究生教材,也可供科研人員和檢驗人員參考。

作者簡介

馮仁青,北京大學生命科學學院副教授,曾齣版《現代抗體技術及其應用》等教材;杜立穎,北京大學生命科學學院實驗技師。

內頁插圖

目錄

第一章 概述
第一節 什麼是流式細胞術?
第二節 流式細胞術能做什麼?
第三節 背景與迴顧
第四節 儀器簡介
一、 BD公司
二、 Beckman Coulter公司
三、 ABI公司
四、 Union Biometrica公司
五、 Apogee 公司
六、 Partec公司
七、 Merck Millipore公司
第五節 前景與展望
一、 流式細胞術與顯微技術結閤
二、 流式細胞術與質譜技術結閤
參考文獻
第二章 流式細胞術原理
第一節 工作原理
第二節 液流係統
一、 鞘液
二、 噴嘴
三、 流式照射室
第三節 光學檢測係統
一、 激光和熒光
二、 激光照射液流
三、 光學信號
四、 光學元件
五、 光學信號檢測係統
第四節 電子控製係統
一、 光電檢測器
二、 通道
三、 閾值
小結
參考文獻
第三章 數據儲存與分析係統
第一節 數據儲存
第二節 數據分析
一、 常用術語
二、 流式圖譜的錶現形式
三、 熒光補償
第三節 數據分析實例
實例一: 雙參數FSC/SSC分析
實例二: 三參數FSC/SSC/FL1分析
實例三: 四參數FSC/SSC/FL1/FL2簡單樣本分析
實例四: 四參數FSC/SSC/FL1/FL2復雜樣本分析
小結
參考文獻
第四章 細胞分選
第一節 細胞分選的原理
一、 液滴形成
二、 延遲時間
三、 液滴充電與偏轉
四、 液滴的收集
第二節 影響分選的因素
一、 分選速度
二、 分選門的設定
三、 分選模式
第三節 分選的質量控製與評價
一、 分選的準確性
二、 分選的效率
三、 無菌分選
四、 分選對細胞活性的影響
第四節 分選前的準備
一、 分選用細胞的製備要求
二、 準備的材料
三、 分選時需要考慮的幾個問題
第五節 細胞分選的應用實例
實例一: 單細胞分選
實例二: 迴收極低比例(<0.01%)的細胞
實例三: 純化穩定的細胞係
實例四: 淋巴細胞分選
實例五: 組織特異性乾細胞分選
實例六: 染料排異性乾細胞分選
實例七: 精子分選
小結
參考文獻
第五章 細胞錶麵標誌的檢測
第一節 血液細胞的檢測
第二節 細胞錶麵標誌的染色技術
一、 細胞錶麵分化抗原
二、 直接染色法和間接染色法
第三節 對照的設置
一、 陰性對照
二、 同型對照
三、 陽性對照
四、 熒光補償
第四節 定量測定
一、 外標法
二、 內標法
三、 標準麯綫法
四、 分辨率
第五節 設門的策略
一、 設門
二、 檢驗門
三、 熒光設門
四、 多色流式分析實例
小結
參考文獻
第六章 細胞內成分的檢測
第一節 流式細胞術檢測細胞內蛋白的特點
第二節 細胞內蛋白染色通則
一、 細胞內蛋白染色的步驟
二、 細胞內蛋白染色應遵循的原則
第三節 磷酸化蛋白的檢測
一、 固定和通透細胞
二、 熒光抗體染色
三、 優化染色方法
四、 多種磷酸化蛋白同時檢測
第四節 細胞因子的檢測
一、 T淋巴細胞的細胞因子檢測
二、 單核細胞的細胞因子檢測
三、 細胞內蛋白檢測的優缺點
第五節 微球免疫測定法
一、 CBA方法的原理
二、 CBA方法的流程
三、 CBA方法的檢測範圍
四、 CBA方法的優缺點
第六節 磷酸化蛋白與DNA同時檢測
小結
參考文獻
第七章 細胞核成分的檢測
第一節 常用的DNA染料
第二節 細胞周期
一、 細胞周期的定量分析方法
二、 粘連細胞的分析
三、 畫門方法
四、 BrdU/PI雙參數分析細胞周期
第三節 細胞周期的動態分析
一、 BrdU/PI雙參數檢測
二、 Hoechst/PI雙參數檢測
第四節 DNA總量分析和倍體分析
一、 DNA總量分析
二、 正常生物體的倍體分析
三、 腫瘤細胞的非整倍體分析
四、 植物倍體的分析
第五節 細胞同步化
一、 自然同步化
二、 人工同步化
第六節 DNA與RNA同時檢測
一、 吖啶橙(AO)同時檢測DNA與RNA
二、 Hoechst 33342/Pyronin Y同時檢測DNA和RNA
第七節 DNA與蛋白質同時檢測
一、 DNA和總蛋白同時檢測
二、 DNA和細胞周期蛋白同時檢測
第八節 染色體分析
小結
參考文獻
第八章 細胞增殖與死亡的檢測
第一節 細胞增殖的檢測
第二節 細胞凋亡的檢測
一、 散射光的檢測
二、 caspases酶檢測
三、 綫粒體膜電位的檢測
四、 質膜的檢測
五、 DNA檢測
六、 細胞衰老與端粒測定
第三節 壞死細胞的檢測
一、 散射光的檢測
二、 膜通透性的檢測
第四節 細胞凋亡、死亡檢測中存在的問題
一、 細胞凋亡的頻率可能與細胞死亡的發生率無關
二、 以DNA片段來估計細胞凋亡頻率的睏難
三、 將凋亡小體或核碎片誤判為凋亡細胞
四、 細胞凋亡、細胞壞死、細胞凋亡的"壞死階段"
五、 樣品製備過程中凋亡細胞的選擇性丟失
六、 吞噬凋亡小體的活細胞僞裝成凋亡細胞
七、 商業試劑/試劑盒存在的問題
八、 細胞形態仍然是鑒定凋亡細胞的黃金標準
小結
參考文獻
第九章 流式細胞術的應用概述
第一節 流式細胞術在生物學研究中的應用
一、 在細胞生物學中的應用
二、 在細胞周期研究和DNA倍體分析中的應用
三、 在細胞凋亡分析中的應用
四、 在染色體核型分析中的應用
五、 在分子遺傳學中的應用
六、 在免疫學中的應用 
七、 在植物學中的應用
第二節 流式細胞術在醫學研究及臨床中的應用
一、 在腫瘤學中的應用
二、 在臨床細胞免疫學中的應用
三、 在血液病治療中的應用
四、 在血栓與齣血性疾病治療中的應用
五、 生物學領域的其他應用
第三節 流式細胞術在農林畜牧養殖業中的應用
一、 在植物學中的應用
二、 在傢畜性彆控製中的應用
三、 在傢畜疾病監控與預防中的應用
第四節 流式細胞術在微生物學中的應用
一、 在病原微生物研究中的應用
二、 在環境微生物研究中的應用
第五節 流式細胞術在食品、藥品檢測方麵的應用
一、 在食品檢測中的應用
二、 在藥品檢測中的應用
第六節 流式細胞術新技術的應用
一、 CBA方法
二、 定量流式細胞術
小結
參考文獻
第十章 樣本製備和染色方法
第一節 單細胞懸液的製備
一、 小鼠末梢血的采集和單細胞懸液的製備
二、 小鼠胸腺的分離和單細胞懸液的製備
三、 小鼠骨髓的采集和單細胞懸液的製備
四、 密度梯度離心法製備外周血單個核細胞懸液
五、 小鼠脾髒的分離和單細胞懸液的製備
六、 小鼠成體乳腺單細胞懸液的製備
七、 小鼠胰腺細胞懸液的製備
第二節 熒光素標記抗體的製備
一、 FITC/ Texas Red 標記
二、 生物素標記
三、 Allophycocyanin(APC)或者Phycoerythrin(PE)標記
第三節 分析和分選用的細胞染色
一、 流式分析用的細胞染色方法
二、 流式分選用的細胞染色方法
三、 SP細胞的染色方法
四、 流式分選用的精子染色方法
第四節 細胞內分子染色
一、 常用的細胞固定方法
二、 細胞內分子的染色方法
三、 細胞內和細胞外分子同時染色的方法
第五節 細胞周期染色
一、 固定全細胞的PI染色方法
二、 非固定細胞的無洗染色方法
三、 BrdU染色方法
四、 植物細胞的DNA染色方法
第六節 細胞同步化實驗方法
一、 過剩胸腺嘧啶脫氧核苷法--S期細胞同步化
二、 羥基脲法--S期細胞同步化
三、 鞦水仙胺法--M期細胞同步化
四、 血清飢餓法--G0期細胞同步化
五、 G1期和G2期細胞同步化實驗方法
第七節 DNA和RNA同時染色
一、 Hoechst 33342/PY同時檢測DNA和RNA
二、 吖啶橙(AO)同時檢測DNA和RNA
第八節 細胞凋亡染色
一、 PI染色法--DNA凋亡峰的檢測
二、 Annexin V/PI雙染色法
三、 Hoechst 33342/PI雙染色法
四、 TUNEL染色法
小結
參考文獻
附錄
一、 流式細胞術相關網址
二、 流式細胞術相關實驗方法網址
三、 熒光素試劑公司
四、 熒光光譜網址
五、 熒光素激發和發射光譜一覽錶


前言/序言



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