植物线虫分子生物学实验教程 林柏荣 pdf epub mobi txt 电子书 下载 2025

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林柏荣 著

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出版社： 中国农业科学技术出版社

ISBN：9787511632104

商品编码：29442696414

包装：平装-胶订

出版时间：2018-05-01

基本信息

书名:植物线虫分子生物学实验教程

定价：20.00元

售价：15.2元,便宜4.8元,折扣76

作者:林柏荣

出版社：中国农业科学技术出版社

出版日期：2018-05-01

ISBN：9787511632104

字数：

页码：

版次：1

装帧：平装-胶订

开本：16开

商品重量：0.4kg

编辑推荐

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内容提要

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《植物线虫分子生物学实验指南》较为系统地介绍了植物线虫学分子生物学实验常用技术方面的基础实验和*近几年发展起来的实验方法和实验原理、流程、操作步骤及注意事项等，包括：DNA的提取、RNA的提取、原位杂交、免疫共沉淀、龄期表达、酵母双杂交、寄主免疫反应调节和RNAi等内容。本书可作为高等农林院校植物保护专业及农林相关专业的植物线虫学实验教学基础教材，也可供高等院校和科研机构从事植物线虫分子生物学研究的科研工作者参考。

目录

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作者介绍

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文摘

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序言

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《植物线虫分子生物学实验教程》 简介 本书旨在为植物保护、农学、分子生物学及相关领域的科研人员、研究生和高年级本科生提供一套全面、实用且与时俱进的植物线虫分子生物学实验技术指导。本书不涉及具体的实验操作步骤，而是侧重于实验设计理念、原理阐述、方法学选择、数据解读以及新兴技术的应用前景，旨在帮助读者掌握解决植物线虫分子生物学研究问题的核心思维和关键技能。 第一部分：实验设计与研究思路 在植物线虫分子生物学研究中，科学的实验设计是获得可靠结果的基础。本部分将深入探讨如何根据具体的研究目标，制定出严谨、高效的实验方案。 研究问题的确立与细化： 强调从实际农业生产或基础科学理论出发，凝练出具有研究价值和可行性的科学问题。例如，针对某种重要的植物线虫病害，如何通过分子生物学手段阐明其致病机制？如何寻找新的抗线虫基因或开发分子诊断技术？如何解析线虫与宿主互作过程中的信号转导通路？ 实验假设的构建： 引导读者根据现有知识和初步观察，提出清晰、可验证的实验假设。明确假设是研究的起点，也是实验结果解读的依据。 实验分组与对照设计： 详细阐述不同类型的对照（阳性对照、阴性对照、技术对照、统计学对照）在实验中的重要性，以及如何根据实验目的设计合理的分组，最大限度地排除非研究因素的干扰，确保结果的准确性。 样本采集与处理策略： 探讨不同类型样本（例如，感染线虫的植物组织、分离的线虫、土壤样本）的最佳采集时间、方法和保存条件。强调样本的代表性、均一性和避免污染的重要性，以及如何为后续的分子实验做好准备。 统计学分析的预设： 在实验设计阶段就考虑数据分析的需求，预设可能的统计学方法，以确保收集到的数据能够被有效地分析和解读。 第二部分：核心分子生物学技术原理与应用 本部分将聚焦于植物线虫分子生物学研究中最常用的核心技术，深入剖析其基本原理、技术要点、优势与局限性，并探讨其在植物线虫研究中的具体应用。 核酸提取与纯化： 原理： 介绍不同核酸提取方法（如CTAB法、SDS法、硅胶柱法）的化学原理，包括细胞裂解、核酸释放、杂质去除和核酸沉淀等关键步骤。 应用： 讨论如何根据线虫种类、样本基质（植物组织、土壤）和后续的应用（PCR、qPCR、测序、基因组学、转录组学）选择最适宜的提取方法。强调核酸的质量和浓度对下游实验成功率的影响。 质量控制： 介绍检测核酸纯度和浓度的常用方法（如紫外分光光度法、琼脂糖凝胶电泳），以及如何评估核酸的完整性。 PCR及其衍生技术： 原理： 详细阐述聚合酶链式反应（PCR）的基本循环原理（变性、退火、延伸），以及 Taq 酶等关键酶的作用。 应用： 基因克隆与鉴定： 如何设计引物，特异性扩增目标基因片段，用于基因结构研究、基因功能分析等。 基因分型与种群结构分析： 利用 PCR 技术进行遗传标记的扩增，分析线虫的遗传多样性和种群动态。 定量PCR (qPCR)： 介绍 qPCR 的荧光检测原理，实现对特定基因表达水平或核酸拷贝数的精确定量。例如，用于研究线虫寄生过程中基因表达的动态变化，或检测植物抗性基因的诱导表达。 反转录PCR (RT-PCR) 与定量RT-PCR (RT-qPCR)： 阐述 RNA 如何逆转录为 cDNA，再进行 PCR 扩增。这是研究基因表达调控的关键技术。例如，用于分析线虫感染前后植物体内基因的表达谱变化。 注意事项： 强调引物设计原则、模板选择、PCR 条件优化（退火温度、Mg2+ 浓度、循环次数）等关键因素。 基因组与转录组测序技术： 原理： 介绍新一代测序（NGS）技术的基本原理，包括 DNA/RNA 打断、文库构建、高通量并行测序以及数据拼接和组装。 应用： 基因组学： 绘制植物线虫的基因组图谱，解析线虫的基因组结构、进化关系，发现新的致病基因、抗性基因位点。 转录组学： 研究线虫感染过程中，植物或线虫的基因表达变化，揭示互作机制、信号通路和调控网络。例如，分析线虫分泌蛋白的变化，或植物防御反应基因的激活。 宏基因组学： 分析土壤或植物根际环境中线虫群落的组成和功能，评估生物多样性，为病害预测和综合防治提供依据。 数据分析： 简要介绍转录组和基因组数据的基本分析流程，包括数据质量控制、比对、差异表达基因分析、功能富集分析等。 蛋白质组学技术： 原理： 介绍质谱（MS）等技术在蛋白质鉴定和定量中的应用，以及蛋白质提取、酶解、色谱分离等步骤。 应用： 线虫分泌蛋白/效应蛋白的鉴定： 识别线虫分泌到宿主细胞中的关键蛋白，这些蛋白往往是调控寄生关系的核心分子。 宿主-病原体互作蛋白质组学： 分析线虫感染前后，植物或线虫体内蛋白质的表达变化，揭示互作过程中的分子事件。 靶向蛋白质组学： 针对特定蛋白家族进行深入研究，验证转录组学或基因组学研究所得的候选基因的蛋白表达情况。 基因编辑技术（CRISPR-Cas9等）： 原理： 阐述 CRISPR-Cas9 系统如何通过 sgRNA 精确定位到基因组特定位点，并由 Cas9 蛋白进行 DNA 切割，从而实现基因的敲除、插入或编辑。 应用： 功能基因验证： 通过敲除或编辑植物线虫的关键基因，研究其在生长、发育、寄生过程中的功能。 基因功能研究： 在植物中引入或敲除与抗性相关的基因，探究其对线虫侵染的效应。 构建基因工程菌株/转基因植物： 为开发新型生物防治或抗性育种提供理论基础。 挑战与展望： 讨论基因编辑在植物线虫研究中的技术瓶颈，如递送效率、脱靶效应以及伦理问题，并展望其未来的发展方向。 分子标记技术： 原理： 介绍不同类型的分子标记（如 SSR、SNP、AFLP）的产生原理及其检测方法。 应用： 遗传多样性与种群分析： 分析线虫种群内的遗传变异，了解其地理分布、迁移模式和进化历史。 致病性/寄生性分析： 寻找与致病性或寄生范围相关的分子标记，为抗性育种提供依据。 分子辅助育种： 利用分子标记筛选具有抗性基因的育种材料，加速育种进程。 第三部分：数据分析与结果解读 本部分将重点阐述如何在实验获得数据后，进行科学、严谨的数据分析，并从中得出有意义的生物学结论。 生物信息学工具的应用： 介绍常用的生物信息学数据库（如 NCBI, EBI, KEGG, GO）以及各种分析软件，例如基因序列比对工具（BLAST）、多序列比对工具（ClustalW）、系统发育树构建软件（MEGA）、基因表达差异分析工具（DESeq2, edgeR）等。 数据可视化： 强调通过图表（如柱状图、折线图、热图、散点图、韦恩图）等方式直观地展示实验结果，便于理解和交流。 统计学方法的选择与应用： 讨论 T 检验、方差分析（ANOVA）、卡方检验、回归分析等常用统计学方法的适用条件和操作要点。强调结果的统计学显著性与生物学意义的结合。 结果的验证与重复性： 强调单个实验结果的局限性，以及通过独立重复实验、使用不同技术平台或多角度验证的重要性，以提高结论的可靠性。 实验误差的识别与规避： 分析可能导致实验误差的来源，如操作失误、试剂污染、仪器故障、样本异质性等，并提出相应的规避策略。 第四部分：新兴技术与未来展望 随着科学技术的飞速发展，植物线虫分子生物学研究也涌现出许多新兴技术和前沿方向。 单细胞测序技术： 介绍单细胞 RNA 测序（scRNA-seq）等技术如何揭示细胞异质性，分析线虫感染过程中不同细胞类型（如神经细胞、肌肉细胞、生殖细胞）的基因表达差异，或研究植物根系中不同细胞对线虫侵染的响应。 空间转录组学： 讨论空间转录组学如何保留基因表达的空间信息，研究线虫侵染过程中，植物组织微环境内基因表达的空间异质性。 基因组编辑在抗虫育种中的应用： 展望基因编辑技术在培育抗线虫作物中的潜力，如定向导入抗性基因、敲除易感性基因等。 组学数据的整合分析： 强调整合基因组学、转录组学、蛋白质组学、代谢组学等多组学数据，建立更全面的分子调控网络模型，深入理解植物线虫互作的复杂性。 机器学习与人工智能在植物线虫研究中的应用： 探索机器学习算法在预测线虫致病性、识别新的药物靶点、分析复杂相互作用网络等方面的潜力。 总结 《植物线虫分子生物学实验教程》将为读者提供一个系统性的学习框架，帮助其理解和掌握植物线虫分子生物学研究的理论基础、技术方法和创新思维。通过本书的学习，读者将能够更有效地设计和执行实验，更准确地分析和解读数据，从而在植物线虫分子生物学领域取得更深入的研究成果。本书力求理论与实践相结合，注重培养读者的科学素养和解决实际问题的能力。

评分☆☆☆☆☆

作为一名刚刚进入植物保护领域的研究生，我迫切需要一本能够指导我进行分子生物学实验的教材。在众多选择中，我最终选择了这本《植物线虫分子生物学实验教程》。这本书的叙述语言非常严谨，但又不失清晰度，每个实验步骤的描述都非常精确，几乎没有歧义。我特别喜欢书中对实验器材和试剂的规格要求，这确保了实验结果的可靠性和可重复性。例如，在进行DNA提取的实验时，书中详细列出了不同提取方法的优缺点，以及针对不同植物组织的选择建议，这让我能够根据自己的实验对象，选择最适合的方法。此外，书中还包含了大量的参考文献，这对于我进行文献调研和深入学习非常有帮助，也为我未来的研究方向提供了很多灵感。让我印象深刻的是，书中对实验结果的分析部分，不光介绍了常用的统计学方法，还提供了数据可视化的建议，这对于撰写学术论文非常有益。感觉这本书不仅仅是一本实验指导书，更是一本入门级的科研方法论。

评分☆☆☆☆☆

我是一位生物技术行业的从业者，虽然我的主要工作不在植物科学领域，但一直对植物寄生性线虫的生物防治技术保持着浓厚的兴趣，尤其是分子生物学手段在该领域的应用。这本书的出版，让我有机会更深入地了解这方面的研究进展。书中对植物线虫的分子检测技术，如PCR、LAMP等，进行了详细的阐述，这些技术在实际应用中具有很高的价值。我特别喜欢书中对不同实验方法的比较分析，这有助于我理解各种技术之间的异同，以及在不同场景下的适用性。此外，书中对一些基因工程技术在构建抗虫性植物方面的应用进行了介绍，这让我看到了生物技术在解决农业生产问题上的巨大潜力。虽然这本书的篇幅不小，但我感觉作者的表达非常精炼，没有多余的废话，每一部分都充满了实质性的内容，对于我这样的忙碌人士来说，这是非常宝贵的。总的来说，这本书给我带来了很多新的视角和启发。

评分☆☆☆☆☆

我是一个长期在野外从事植物病理学研究的基层技术人员，平时工作中接触到不少与线虫相关的病害，但限于条件和知识储备，对线虫的分子生物学研究一直处于一种“知其然，不知其所以然”的状态。所以，当我在书店里偶然看到这本书时，眼睛立刻就亮了。这本书的标题就直指我的痛点，而翻开后，我更是惊喜不断。作者在实验设计的细节上，考虑得非常周全，很多我之前想都没想过的操作要点，在这本书里都得到了细致的讲解。例如，在某个章节中，作者详细介绍了如何优化PCR的反应条件，这对于我们这些实验条件相对简陋的单位来说，简直是雪中送炭，能够大大提高实验的成功率。而且，书中不仅提供了标准的实验流程，还对可能出现的各种问题进行了预判，并给出了相应的解决方案，这种“防患于未然”的写作风格，让我觉得作者是真的站在读者的角度去考虑问题的。我尤其欣赏书中对于实验原理的阐述，不是简单罗列公式，而是用通俗易懂的语言，结合具体的实验案例，将复杂的分子生物学原理讲得明明白白，这对于我这样的非专业科班出身的读者来说，帮助太大了。

评分☆☆☆☆☆

这本书的装帧设计我非常喜欢，封面色彩搭配沉稳大气，图片的选取也很贴合主题，能立刻吸引到我这个对植物线虫领域略有耳闻的读者。拿到手上，纸张的触感也相当不错，厚实且光滑，印刷字迹清晰，没有出现模糊或错别字的情况，这对于一本实验教程来说非常重要，细节决定成败嘛。我初步翻阅了一下目录，感觉内容安排得很有逻辑性，从基础的理论知识讲到具体的实验操作，再到数据分析和结果解读，循序渐进，非常适合我这种想要系统学习的读者。尤其是实验部分，感觉描述得非常详细，每一步都配有图示，这对于初学者来说简直是福音，我一直担心自己动手能力不强，看到这样的安排，心里踏实了不少。而且，书中对实验仪器的介绍和使用注意事项也相当到位，这一点我特别看重，毕竟实验安全和操作规范是第一位的。整体感觉，这本书在内容和形式上都做到了很好的平衡，既有学术深度，又不失可读性，让我对即将开始的学习充满期待。

评分☆☆☆☆☆

我是一名对植物病原线虫的致病机制非常感兴趣的科研人员，尤其关注分子水平上的互作。在日常的研究中，经常需要接触到各种分子生物学技术，但一直缺乏一本系统性的、专注于植物线虫领域的实验教程。这本书的出现，无疑填补了这一空白。书中对于几种关键的分子生物学技术，如基因克隆、表达载体构建、RNAi干扰等，都进行了非常详细的介绍。而且，作者在每个实验的描述中，都融入了植物线虫相关的具体案例，这让我在学习技术的同时，也能够加深对植物线虫生物学特性和分子机制的理解。我尤其欣赏书中对实验结果的讨论部分，作者不仅给出了标准解读，还探讨了不同结果可能蕴含的生物学意义，这极大地拓展了我的研究思路。另外，书中对一些前沿技术的介绍，如CRISPR/Cas9在植物线虫基因编辑方面的应用，也让我看到了未来研究的新方向，非常具有启发性。