实用细胞培养技术(第2版) pdf epub mobi txt 电子书 下载 2025

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张卓然 编

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出版社： 人民卫生

ISBN：9787117165655

商品编码：1029395017

开本：16

出版时间：2012-12-01

  详情信息：

  Product Details 基本信息

ISBN-13 书号:9780822350378

出版社:Duke University Press

Publication Date 出版日期:2012-04-17

Product Dimensions 商品尺寸:25.4x20.6x2cm

Shipping Weight 商品重量:1.047kg

Shipping Weight Language 语种:English

pages 页数:248

好的，这是一本关于先进分子生物学研究方法的图书简介，内容涵盖了当前生命科学研究中最前沿和最核心的技术体系。 --- 《前沿分子生物学：从基因组编辑到单细胞解析》 本书导言：解码生命复杂性的新时代工具箱 在二十一世纪的生命科学领域，我们正经历一场由技术驱动的深刻变革。对生命体复杂性的理解，已不再局限于宏观的组织器官层面，而是深入到分子、亚细胞乃至单个细胞的动态活动之中。本书《前沿分子生物学：从基因组编辑到单细胞解析》正是为应对这一挑战而编写的，它汇集了当前实验室中最具革命性、最不可或缺的分子生物学技术。本书旨在为研究生、青年科研人员以及资深研究者提供一份全面、深入且高度实用的技术指南，使读者能够熟练掌握并创新性地运用这些工具，以解决复杂的生物学难题。 第一部分：基因组工程的革命——精准调控与改造 本部分聚焦于当前分子生物学领域最具颠覆性的技术——基因组编辑系统。 第一章：CRISPR-Cas9系统的深入应用与优化 详细阐述了CRISPR-Cas9系统的基本原理、 sgRNA的设计策略（包括脱靶效应的预测与最小化），并深入探讨了各种主流的修饰系统。重点介绍了Prime Editing（先导编辑）和Base Editing（碱基编辑）的机制，这些技术突破了传统CRISPR只能造成双链断裂的限制，实现了对基因组的精准“点突变”和“小片段插入/删除”操作。书中提供了优化载体构建、高效递送系统（如AAV病毒载体和脂质纳米颗粒LNP）的实用方案，并探讨了如何将这些系统应用于复杂的模式生物（如神经干细胞、体外诱导多能干细胞iPSCs）中，以建立稳定的遗传修饰模型。此外，还包含了CRISPR筛选技术的完整流程，包括全基因组CRISPR文库的构建、筛选的统计学分析，及其在药物靶点发现中的应用案例。 第二章：新兴核酸编辑技术与表观遗传调控 超越DNA编辑，本章着重介绍了针对RNA和表观遗传标记的调控技术。内容涵盖了REPAIR（RNA Editing for Programmable A-to-I Replacement）系统，以及如何利用dCas9融合蛋白（如dCas9-DNMT3A或dCas9-TET1）实现对DNA甲基化和组蛋白修饰的特异性重编程。详细分析了如何通过这些技术来模拟疾病状态下的表观遗传改变，并用于研究基因沉默与激活的动态过程。 第二部分：高分辨率蛋白质组学与相互作用组 理解蛋白质的功能，必须深入其在细胞内的定位、修饰状态以及与其他分子的相互作用网络。本部分构建了从蛋白质分离、鉴定到功能分析的全景图。 第三章：基于质谱的蛋白质组学与翻译后修饰（PTM）分析 本章深入探讨了高分辨液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）在蛋白质组学中的应用。详细介绍了“标记定量”策略，如TMT（Tandem Mass Tag）和iTRAQ的实验设计与数据解读。重点内容是PTM的富集与鉴定，包括磷酸化肽段、泛素化修饰、糖基化位点的特异性捕获技术（如TiO2、IMAC色谱柱的应用），以及如何通过数据挖掘确定关键信号通路的调控节点。 第四章：体内/体外蛋白质相互作用研究的先进方法 针对蛋白质复杂的网络结构，本书介绍了识别和验证分子间相互作用的尖端技术。内容包括：BioID（生物素化邻近标记）和TurboID在体内快速捕获蛋白质邻域的技术细节；AP-MS（亲和纯化-质谱法）的优化步骤，以减少非特异性背景；以及高灵敏度的FRET（Förster共振能量转移）和BRET（生物发光共振能量转移）技术在活细胞内监测分子动态结合与解离的实践。 第三部分：单细胞技术——洞察异质性的钥匙 细胞异质性是生物学复杂性的核心来源。本部分全面覆盖了单细胞技术从基因组到转录组和表型的全流程解析。 第五章：单细胞测序技术（scRNA-seq）的原理与实践 本书详细对比了主流的微流控平台（如10x Genomics, Drop-seq）和基于孔板的平台（如Smart-seq3）的优缺点及适用场景。在数据分析方面，不仅介绍了降维（PCA, UMAP, t-SNE）和细胞分群（Clustering）的标准流程，更侧重于轨迹推断（Trajectory Inference）算法，如Monocle和PAGA，用于解析细胞命运决定过程。此外，深入探讨了细胞间通讯分析（Cell-Cell Communication）的配体-受体预测方法。 第六章：多组学整合与空间转录组学 随着单细胞技术的发展，如何整合来自同一细胞的不同维度信息（如scATAC-seq+scRNA-seq）成为关键。本章详细讲解了多组学整合（Multi-omics Integration）的方法，如Seurat V4的CCA/WNN模块，用于构建更全面的细胞表征。重头戏在于空间转录组学（Spatial Transcriptomics），包括Visium和Slide-seq等平台的操作流程、数据配准技术，以及如何将基因表达图谱与组织形态学相结合，实现“有图可寻”的分子定位研究。 第七章：功能性单细胞筛选与表型分析 本书拓展了单细胞分析的范畴，涵盖了对其功能进行操作和验证的技术。介绍了如何结合单细胞CRISPR筛选来识别单个细胞水平上的功能性基因，以及如何利用高内涵成像（High-Content Imaging, HCI）配合AI图像分析，实现对数万个细胞的形态学和蛋白表达的自动化定量分析。 总结与展望 《前沿分子生物学：从基因组编辑到单细胞解析》不仅是一本技术手册，更是一份面向未来研究的蓝图。通过对这些核心技术的系统梳理和深度解析，本书旨在帮助读者跨越技术壁垒，将精力集中于生物学问题的创新性思考与设计上，从而推动生命科学研究迈向更精准、更精细化的新高度。掌握这些工具，就是掌握了在未来十年科研竞争中的核心竞争力。

评分☆☆☆☆☆

作为一名有一定细胞培养经验的研究生，我一直觉得自己在某些细节上的处理不够规范，也希望能系统地梳理一下理论知识。这次拜读《实用细胞培养技术（第2版）》，给我带来了许多启发。虽然书中的基础操作部分我已熟悉，但作者在讲解中融入的许多“为什么”让我受益匪浅。比如，为什么选择某种特定的培养基，不同成分的作用是什么，这些细枝末节往往决定了实验的成败。书中对细胞传代、冻存和复苏的详细论述，也让我认识到自己之前在这些环节上的一些疏漏。特别是关于细胞污染的预防和处理，书中给出了非常系统化的策略，远不止是简单的“消毒”二字。此外，这本书还涵盖了许多进阶的内容，比如一些特殊细胞的培养方法，以及一些常用的细胞功能检测技术，这些都为我后续的研究方向提供了宝贵的参考。我尤其欣赏书中对实验设计和结果分析的建议，这对于提高实验效率和数据的可靠性至关重要。总的来说，这本书不仅适合新手入门，对于有一定基础的科研人员来说，也是一本值得反复研读的工具书。

评分☆☆☆☆☆

这本书的结构设计非常人性化，我之前购买过几本相关的书籍，要么过于理论化，要么操作指导不够细致。《实用细胞培养技术（第2版）》在这方面做得非常出色。它将复杂的细胞培养过程分解成一个个可执行的步骤，并配以清晰的插图，让我即使是初次接触，也能轻松理解。我最看重的是书中对“细节决定成败”的强调。从无菌操作的每一个环节，到培养基的pH值、渗透压的控制，再到细胞计数的准确性，作者都进行了深入的阐述。这些看似微不足道的细节，往往是影响细胞生长和实验结果的关键。书中还特别提到了如何避免和处理一些常见的实验错误，这对于节省时间和试剂，避免不必要的挫败感非常有价值。我之前尝试过几次细胞培养，效果都不理想，现在回想起来，很可能是因为忽略了书中强调的这些关键细节。这本书给了我系统的指导，让我对未来的实验充满了信心。

评分☆☆☆☆☆

这本书简直是新手小白的福音！我一直对细胞培养这个领域很感兴趣，但又担心自己动手能力不行，文献看得头晕眼花。拿到《实用细胞培养技术（第2版）》这本书后，我真是如获至宝。它不像很多专业书籍那样一开始就抛出晦涩难懂的理论，而是从最基础的操作讲起，比如无菌操作的重要性、不同类型细胞的生长环境需求、培养基的配制和选择等等。书中有很多图文并茂的讲解，详细到每一个步骤的细节，生怕读者漏掉任何一个关键点。我尤其喜欢它对常见问题的分析和解决方案，比如培养过程中出现污染怎么办，细胞状态不佳该如何调整，这些都是我在实际操作中可能会遇到的难题，这本书都提前帮我考虑到了。阅读过程中，我感觉作者就像一位经验丰富的手把手老师，耐心细致地指导着我，让我对细胞培养这个过程的信心倍增。这本书的语言也非常平实易懂，没有过多华丽的辞藻，而是直击核心，用最清晰明了的方式传达知识。我迫不及待地想跟着书中的指导，开始我的第一次细胞培养实验了！

评分☆☆☆☆☆

我对《实用细胞培养技术（第2版）》的评价是，这是一本集理论与实践于一体的优秀教材。作者在梳理基础理论的同时，并没有忽略实践操作的重要性。书中对各种培养模式的介绍，无论是二维培养还是三维培养，都给出了详细的指导和应用前景的分析。我尤其喜欢它对一些前沿技术，如干细胞培养、工程细胞培养等方面的介绍，这让我能够了解到细胞培养技术最新的发展动态。同时，书中对于数据分析和统计方法的阐述，也为我后续的科研工作提供了重要的理论支持。我常常会在阅读过程中思考，如何将书中的知识应用到我自己的研究课题中。这本书不仅仅是一本操作手册，更是一本能够启发思考、拓展视野的学术读物。它让我认识到，细胞培养技术并非一成不变，而是在不断发展和进步的。对于渴望在细胞培养领域深入研究的同行们来说，这本书绝对是一本不可多得的参考书。

评分☆☆☆☆☆

我是一名刚接触生物医药行业的技术员，之前对细胞培养一窍不通，这次公司组织培训，我们学习的教材就是《实用细胞培养技术（第2版）》。坦白说，一开始我压力很大，担心跟不上。但这本书的内容组织得非常有条理，从基本原理到具体操作，一步步循序渐进。书中对各种细胞培养设备的使用说明特别详细，比如超净工作台、二氧化碳培养箱、离心机等，每一个按钮的作用，每一个注意事项都写得清清楚楚，让我感觉操作起来心里很有底。我特别喜欢它列举的许多实际案例，这些案例都紧密结合了临床和科研的需求，让我明白了细胞培养在实际应用中的重要性，也更能体会到规范操作的必要性。而且，书中对于实验记录和报告的书写也有指导，这对我们这种需要严谨记录的工作来说非常有帮助。虽然我还在学习阶段，但这本书已经让我对细胞培养这个领域有了初步但深刻的认识，为我今后的工作打下了坚实的基础。