內容簡介
《應用生物技術大係 益生乳酸細菌:分子生物學及生物技術》分上、下兩篇。上篇有十二章,主要介紹:一、益生乳酸細菌的遺傳組織結構及功能,包括基因組學中的結構基因組學、蛋白質基因組學和功能基因組學。二、益生乳酸細菌的基因工程及其調控,各類載體和受體的分子剋隆體係及轉化方法;細胞錶麵工程及應用;益生乳酸細菌作為抗原基因載體和藥物分子載體的應用和前景;食用乳酸菌的代謝及基因修飾。三、益生乳酸細菌對生産和應用中遇到的各種環境的應激反應機理。四、益生乳酸細菌的主要代謝産物和次生代謝産物。五、益生乳酸細菌的發酵工程,包括直投式發酵、高密度培養、細胞的濃縮收集和噬菌體的防治。六、益生乳酸細菌在生産和應用中防禦各種環境對細胞損傷的措施和定嚮靶位給藥(菌)的方法。下篇有20個與上篇有關的實驗,包括菌的生理功能、分子生物學方法的鑒定、噬菌體的分離、DNA的提取、遺傳轉化和DNA洗牌育種等。
《應用生物技術大係 益生乳酸細菌:分子生物學及生物技術》對從事微生物學、微生態學、食品科學、免疫學、疫苗、分子剋隆、乳酸、多糖、細菌素等研究人員、教師、研究生以及從事益生菌、乳品工業、食品工業、製藥工業、發酵工業的工作人員和其他相關人員具有重要的參考價值。
內頁插圖
目錄
序一
序二
前言
上篇 益生乳酸細菌的分子生物學及生物技術基礎
第一章 乳酸細菌基因組學
第一節 乳酸細菌的基因組學研究
一、基因組學定義
二、乳酸細菌的基因組學研究
第二節 乳杆菌的基因組
一、嗜酸乳杆菌的基因組學
二、植物乳杆菌的基因組學
三、約氏乳杆菌的基因組學
第三節 乳酸乳球菌的基因組學
一、基因組結構
二、信息加工
三、能量代謝和轉運蛋白
四、細胞壁代謝
第四節 嗜熱鏈球菌的基因組學
一、基因組結構
二、失活的嗜熱鏈球菌基因
三、嗜熱鏈球菌中無毒力基因
四、嗜熱鏈球菌中基因的橫嚮轉移
第五節 雙歧杆菌的基因組學
第六節 乳酸細菌功能基因組學
一、乳酸細菌功能基因組學研究方法與遺傳工具
二、乳酸細菌功能基因組學研究
縮寫詞
主要參考文獻
第二章 乳酸細菌的基因工程
第一節 乳酸細菌分子剋隆載體
一、乳酸細菌質粒型剋隆載體
二、乳酸細菌質粒型錶達載體
三、乳酸細菌整閤型載體
第二節 乳酸細菌分子剋隆的受體和轉化
一、受體的選擇
二、轉化
主要參考文獻
第三章 乳酸細菌細胞錶麵工程及應用
第一節 細菌細胞錶麵的S-層
一、S-層的結構
二、S-層的化學和分子生物學特徵
三、S-層的功能及應用
第二節 乳杆菌細胞錶麵的S-層
一、乳杆菌S-層的特點
二、乳杆菌S-層的基因
三、S-層與細胞的吸附
第三節 微生物錶麵展示技術
一、噬菌體展示技術
二、酵母細胞錶麵展示技術
三、細菌錶麵異源分子的錨定
第四節 乳杆菌細胞錶麵S-層的應用
一、異源蛋白生産
二、活菌疫苗
三、展示異源抗原錶位
主要參考文獻
第四章 食品用乳酸細菌的代謝和遺傳修飾
第一節 乳酸細菌産生的香味物質
一、雙乙酰(丁二酮)
二、乙醛
三、酯
四、氨基酸代謝産物
第二節 乳酸細菌與乾酪生産
一、乳酸細菌的肽酶
二、食品級重組體的肽酶活性
第三節 活性物質的閤成與調控
一、葉酸
二、共軛亞油酸
主要參考文獻
第五章 乳酸細菌對環境的應激反應
第一節 乳酸細菌對酸的應激反應
一、保持pH體內穩態的機製
二、乳酸細菌在酸適應中誘導和阻抑的基因和蛋白質
三、酸應激反應中的全局應激調節係統
第二節 乳酸細菌對高溫的應激反應
一、乳酸細菌在熱適應中誘導和阻抑的基因和蛋白質
二、乳酸細菌熱激蛋白的調節作用
三、乳酸細菌熱激反應的全局調節作用
第三節 乳酸細菌對低溫的應激反應
一、乳酸細菌對低溫的適應性反應和冷誘導蛋白
二、乳酸細菌的冷激蛋白
三、乳酸細菌的耐冷性和交互保護作用
第四節 乳酸細菌的抗氧化應激反應
一、細胞內還原環境
二、防止活性氧品種的形成
三、清除活性氧組分
四、氧化傷害的修復
五、參與防禦氧化脅迫的基因和誘導的蛋白質
第五節 乳酸細菌對滲透脅迫的抗性
一、滲透脅迫和可混溶溶質
二、甘氨酸甜菜堿吸收係統
三、乳酸細菌在滲透脅迫中誘導和阻抑的基因和蛋白質
第六節 乳酸細菌對膽汁的耐性
一、乳酸細菌和膽汁鹽水解酶
二、乳酸細菌對膽汁脅迫的適應性反應
三、抗多種藥物的排齣係統
第七節 乳酸細菌的飢餓反應和全麵應激狀態
一、穩定期和營養飢餓反應
二、全麵應激反應和通用應激蛋白
三、嚴緊型反應和全局調節子
第八節 乳酸細菌應激反應在生産中的應用
一、適應性反應和乳酸細菌的應激抗性
二、基因工程技術和抗應激菌株的選育
主要參考文獻
第六章 益生乳酸細菌作為抗原和藥物分子的載體
第一節 黏膜免疫係統與益生乳酸細菌
一、黏膜免疫的重要性
二、胃腸道黏膜免疫係統
三、Toll樣受體在免疫調節中的作用
四、益生乳酸細菌的免疫調節作用
第二節 益生乳酸細菌的黏膜免疫疫苗
一、黏膜免疫疫苗的設計
二、黏膜疫苗的運載釋放係統
三、黏膜免疫佐劑
四、黏膜免疫的接種途徑
五、乳酸細菌作為TTFC的疫苗載體
第三節 益生乳酸細菌作為抗原的載體
一、防感染疫苗
二、防敏疫苗
三、計生疫苗
四、防宮頸癌疫苗
五、防艾滋病疫苗
六、防寄生蟲疫苗
七、防動物感染疫苗
八、DNA疫苗
第四節 益生乳酸細菌作為藥物分子的載體
一、細胞因子與免疫反應和抗炎反應的關係
二、局部定位給藥治療的新途徑
第五節 研製安全高效方便價廉的疫苗
一、生物防範外源基因和遺傳修飾菌在環境中釋放
二、把抗原基因錨定在細胞錶麵
三、乳酸乳球菌外殼-蛋白錨定係統
主要參考文獻
……
第八章 乳酸細菌的乳酸發酵
第九章 乳酸細菌産生的細菌素和類細菌素
第十章 乳酸細菌的發酵工程
第十一章 乳酸細菌噬菌體及其防治
第十二章 研製高質量益生乳酸細菌製品
下篇 益生乳酸細菌的實驗技術
附錄 最新乳酸杆菌屬和雙歧杆菌屬的種群變化
前言/序言
産乳酸的菌不隻是細菌,産乳酸的細菌也不都是對人體有益的。書中的內容主要是講對人和動物有益細菌的分子生物學和生物技術,所以本書名為《益生乳酸細菌——分子生物學及生物技術》(Probiotic Lactic Acid Bacteria:Molecular Biology and Biotechnology)。
在自然界存在的人類、動物和植物,不論體錶還是體內都有大量的微生物參與活動。微生物和宿主有各自的生理生化體係,但是兩者存在著相互促進和相互製約的關係。宿主的正常生理生化參數和病理參數都是兩者相互作用的結果。
益生乳酸細菌能促進機體微生物菌群和酶的平衡以及刺激特異性和非特異性的免疫機製,達到防治某些疾病、促進發育、增強體質、延緩衰老和延長壽命的目的。
益生乳酸細菌資源豐富、種類繁多,在理論上有重要的學術價值。益生乳酸細菌有豐富的基因庫,它是生物多樣性的依據,是研究分類、生理生化、遺傳、分子生物學、基因工程的理想材料,也是利用其生物學特性和發酵産物為工、農、醫、食品、飼料、化工等服務的極好資源。從遺傳物質的組成上講,益生乳酸細菌除瞭有正常的染色體DNA外,還有不同類型的轉座子、插入序列以及質粒,這類質粒在每個細胞中數量大、功能多,這在其他菌中是少見的;從生長特性上講,益生乳酸細菌有兼性厭氧和專性厭氧兩個類型;從形態上講,這類菌有杆狀、球狀、不規則等多種形態;從生態上講分布極為廣泛,除極端環境外,到處可見。
益生乳酸細菌與人和動物的生命活動息息相關,是人和動物體內必不可少的重要生理菌群,它有重要的生理功能、理想的保健和醫療效果。它阻止緻病菌的定植、誘發腸道黏膜免疫、降低膽固醇、控製內毒素、清除基因毒素(genotoxin)、製造營養物質、刺激組織發育,所以它對機體的營養狀態、生理功能、細胞感染、藥物效應、毒性反應、免疫應答、腫瘤發生、衰老過程及應激反應等都有作用,因此說,不瞭解益生乳酸細菌的生理功能,等於不完全瞭解人和動物的生命活動,如果益生乳酸細菌在體內停止生長或消失,人和動物就難以健康生存。
益生乳酸細菌在國民經濟建設中起著不可替代的作用,具有很好的經濟效益。益生乳酸細菌産生的L一乳酸能閤成聚乳酸,可用於醫療和生物可降解的各種製品;寡糖和多糖可用於食品的生産,能促進有益菌的生長,增加免疫功能,它還是生物錶麵活性劑。益生乳酸細菌産生的次生代謝産物——細菌素和類細菌素是國際公認的食品級防腐劑,已用於食品防腐和防治某些傳染性疾病,不會引起細菌耐藥性;它産生的D-氨基酸是閤成某些藥物的原料。益生乳酸細菌産生的特殊蛋白酶能分解牛乳蛋白並産生肽類,這種肽類有抑製血管緊張肽轉換酶的作用,進而起到降低血壓的功效。不同類型的原料經益生乳酸細菌發酵後能産生具有生物活性的物質,如植酸酶、糖苷酶和異黃酮,各種類型的發酵食品以及可口健身的飲料和葡萄酒中的蘋果酸——乳酸。益生乳酸細菌還是青貯飼料必不可少的發酵劑。
益生乳酸細菌對微環境和大環境有扶正祛邪、去汙保潔的綠色環保作用,有很好的生態效應。人和動物的呼吸道、消化道和泌尿生殖道的微環境生態係統是長期進化形成的,各類微生物是以“定性、定量、定位和定主”的方式組成和存在的,在這個係統中,益生乳酸細菌對各個菌群起著平衡、抑製和清除毒物的作用,在這“四定”中隻要有一個齣問題,生態的平衡就可能被打破從而導緻疾病發生。在某些大環境中,益生乳酸細菌也有維持和恢復生態平衡的功能,益生乳酸細菌所産生的酶類,對脫毒脫臭起著重要作用。
人類從古代就有意或無意地利用益生乳酸細菌進行保健,但其真正從科學上進行定性、定量的分析和臨床的驗證,也隻有30多年的曆史。就在這30多年中,由於有瞭科學的理論依據,益生乳酸細菌在世界範圍內取得瞭突飛猛進的發展。應該說,益生乳酸細菌作為微生態學的重要部分,對它的研究和開發,隻是剛剛開始。要知道,我們對微生物和宿主之間相互作用的瞭解還遠遠不夠,一大堆生物學問題擺在我們麵前去探討。對它的研究有助於瞭解兩者之間相互作用所導緻的生理生化變化、病理變化、免疫反應和衰老過程等一係列生理、病理參數。同時也能進一步改進益生乳酸細菌的生理功能,擴大應用範圍。
國際上的基礎研究在這方麵已取得瞭巨大進展,諸如基因組的分析、保守序列的確認、質粒功能的鑒定、特異性功能噬菌體的發現、細胞錶麵的遺傳修飾、應激反應機理的探討、細菌素的開發、代謝工程的調控、乳酸的定嚮閤成、多糖積纍的生化機製、各種載體的構建、有益基因的剋隆等都有很高的水平。緊隨基礎研究的深入,應用研究也在蓬勃發展,利用分子技術已能快速準確鑒定菌種;遺傳修飾的發酵劑(起子)已能使乳酪早熟、風味改善;細菌素殺菌譜已經拓寬;應激反應的機製也已用於生産;質粒已能控製相應噬菌體的感染;具有經濟價值和生理功能的代謝産物正在開發;胞外多糖可用做食品添加劑,食用這種食品可提高免疫功能;乳酸的産量已大大提高,可製備聚乳酸;益生乳酸細菌的細胞錶麵工程前景誘人,能應用於多個領域;剋隆載體種類繁多;有益基因的剋隆更增加瞭益生乳酸細菌的生理功能;口服疫苗更是熱門,有的已在臨床試用;基因工程菌正在用於替代治療(replacement therapy)。總之,高技術正在使益生細菌成為大産業。
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