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评分有趣的是,20和40微摩每升的DHA在caspase-9 DN细胞中引起的一个与caspase-3无关的PARP差异和坏死(图2B和C)。我们因此检测了DHA是否能激活PARP和AIF依赖的程序性坏死。在这个途径中,AIF通过一个从全长的AIF成为一个缩短到57Kda的蛋白质的蛋白水解的过程而从线粒体中释放出来。然而,用40微摩每升的DHA处理caspase- 9 DN Jurkat 细胞不会增加细胞中缩短的AIF水平,反对着与caspase-3无关的caspase-9 DN Jurkat细胞中程序性坏死的机制。
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评分这些说明了caspase8和FADD在DHA诱导的Jurkat细胞死亡中是不必要的。caspase-8不敏感的Jurkat细胞中凋亡反应的轻微减少可能反映线粒体通过caspase-8减弱了凋亡信号在下游的放大(图1C)。泛caspase抑制剂zVAD -fmk的增加取消了DHA诱导的caspase-3活化和细胞核碎片化,说明caspase活化对于DHA诱导的细胞死亡是必须的。然而,一个基本的PARP水平差距还是能在zVAD –fmk处理的样品中检测到,尤其是在FADD不敏感的A3细胞中(图1D,补充图S2B)。因为zVAD –fmk的存在也触发了Hoechst 33342 PI染色样品中坏死核的出现(图1D)。这些残余的PARP差异可能是诱发坏死的结果。
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