病毒的电子显微学研究 下载 mobi epub pdf 电子书 2024

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内容简介

　　《病毒的电子显微学研究》主要介绍研究病毒的各种电子显微学方法以及*新进展和取得的成果，内容包括：病毒样品的超薄切片技术，病毒的分离、纯化和病毒样颗粒的组装，病毒免疫电镜技术，生物材料的高分辨率电子显微技术，冷冻电镜单颗粒技术和冷冻电镜电子断层成像技术等。理论介绍尽量做到浅显易懂，书中示例也取自经典的或者*近几年的科研成果。此外，在绪论中简略概述病毒的电子显微学研究的进展。
　　病毒的电子显微学研究在近十多年来有许多理论和技术上的突破，发展迅速、成果斐然，其中也有《病毒的电子显微学研究》部分作者参与的工作，书中均做了翔实介绍。
　　《病毒的电子显微学研究》可供病毒学、结构生物学、流行病学、电镜等领域的科技工作者，以及高等院校有关专业师生参考。

内页插图

目录

前言

第1章 绪论
1．1 病毒形态、结构和化学组分
1．1．1 电镜下的病毒形态
1．1．2 病毒的结构
1．1．3 病毒的组分
1．2 病毒分类系统
1．2．1 病毒的主要类群
1．2．2 病毒的分类和命名
1．2．3 病毒分类系统
1．3 病毒入侵、繁殖及病理变化
1．3．1 病毒的入侵
1．3．2 病毒的繁殖
1．3．3 病毒引起宿主细胞的病理变化
1．3．4 病毒的释放
1．4 病毒的电镜诊断和鉴定
1．4．1 病毒电镜诊断鉴定的依据
1．4．2 病毒电镜诊断鉴定的特点

第2章 病毒样品的超薄切片技术
2．1 常温超薄切片技术的取材与固定
2．1．1 取材
2．1．2 固定
2．2 常温超薄切片技术的脱水、渗透和包埋
2．2．1 脱水
2．2．2 渗透和包埋
2．3 常温超薄切片的制作和染色
2．3．1 常温超薄切片的制作方法
2．3．2 染色液和染色方法
2．4 冷冻超薄切片技术
2．4．1 取材、醛固定和包封
2．4．2 冷冻保护处理与冷冻固定
2．4．3 冷冻超薄切片
2．5 冷冻置换技术
2．5．1 冷冻置换的基本原理
2．5．2 冷冻置换介质
2．5．3 冷冻置换的方法
2．5．4 影响冷冻置换的因素

第3章 病毒的分离、纯化与病毒样颗粒的组装
3．1 病毒的分离纯化
3．1．1 病毒的分离
3．1．2 病毒的纯化
3．2 病毒纯化的超速离心技术
3．2．1 原理与设备
3．2．2 病毒离心纯化方法
3．3 病毒衣壳蛋白的体外表达与病毒样颗粒的组装
3．3．1 病毒样颗粒在大肠杆菌表达系统中的表达与组装
3．3．2 病毒样颗粒在昆虫杆状病毒表达系统中的表达与组装
3．3．3 病毒样颗粒体外表达研究进展
3．4 负染色技术
3．4．1 负染色液的制备
3．4．2 染色方法
3．4．3 操作中的注意事项

第4章 病毒免疫电镜技术
4．1 概述
4．2 抗原-抗体免疫复合物电镜技术
4．2．1 吸附法
4．2．2 修饰法
4．2．3 吸附-修饰法
4．2．4 凝集法
4．3 免疫标记电镜技术的基本方法
4．3．1 取材与固定
4．3．2 免疫标记方法
4．3．3 样品包埋
4．3．4 对照实验
4．4 铁蛋白标记电镜技术
4．4．1 铁蛋白标记抗体的制备
4．4．2 铁蛋白标记电镜技术的应用
4．5 酶标记电镜技术
4．5．1 酶标记抗体
4．5．2 PAP技术
4．5．3 酶标记电镜技术的应用
4．6 胶体金标记电镜技术
4．6．1 胶体金探针的制备技术
4．6．2 胶体金标记电镜技术的应用
4．7 电镜原位杂交技术
4．7．1 同位素标记cRNA探针电镜原位杂交
4．7．2 生物素标记DNA探针电镜原位杂交
4．7．3 地高辛标记rRNA探针电镜原位杂交
4．7．4 电镜原位杂交技术的注意事项

第5章 生物样品的高分辨电子显微技术
第6章 冷冻电镜单颗粒技术与病毒研究
第7章 电子断层成像技术与病毒研究
参考文献
附录 国际病毒分类系统的科与属（ICTV，2009年）
图版

前言/序言

　　许多病毒给人类的健康和生命，以及农、林、牧、渔等产业造成了巨大的威胁和灾害，如肝炎病毒、艾滋病病毒、SARS冠状病毒、流感病毒等。据测算，我国有10%人口携带乙肝病毒（HBV），有8%～10%慢性乙肝病患者可能发展为肝硬化和肝癌。艾滋病病毒（HIV）引起艾滋病，自1981年发现以来全球累计有近2000万人死于艾滋病。可以说这些小小的病毒是人类在生物界中最可怕的敌人！同时，病毒存在的范围非常广，几乎所有的生物体都发现会被病毒所感染。因此，人类有可能利用病毒防治一些有害生物，如利用昆虫核多角体病毒（NPV）防治农作物害虫等。此外，病毒又是最简单、最小的有机体，它明显地体现出生物物质的特征，如生长增殖、遗传变异及相关的进化过程等。因此，病毒学的研究不单能防治它和利用它防治其他有害生物，而且病毒本身也是研究生命现象和了解生命本质的极好的研究材料。病毒学因而成为当前国际科学研究的前沿和热点。
　　1892年Ivanovski发现了烟草花叶病病原体具有过滤性之后，Beijerinck大胆设想这是一种新型的生物因子，病毒就逐渐被人们认识了。然而，在三十多年里，人们只是把它看成为一种过滤性的致病因子，仍未引起科学家们的重视。直至1939年，Kausche首次用电子显微镜直接观察到烟草花叶病毒（TMV），人们才把病毒看成实在的生物体。此后在相当长的时间内，人们判断是否是病毒时，其中一个标准是：是否只有电镜才能观察到。可见电镜对病毒研究的重要性。
　　目前，电子显微学方法在病毒学的研究中，无论是病毒形态发生、病理、分类，还是新病毒的发现等研究，都有着非常重要和不可或缺的作用。尤其近二十多年来，生物电子显微学有了飞跃的发展。由于引进了高分辨成像技术和计算机图像处理技术等，以及冷冻技术和生物样品制备技术的快速发展，一个新学科——生物大分子电子显微学出现了。特别是在20世纪90年代出现了冷冻电镜单颗粒技术和冷冻电镜断层扫描技术，它不仅能够很好保存病毒处于自然状态而不需要结晶，而且不受病毒尺度大小的限制，并能够获得接近原子分辨率的三维结构，在几年之后其分辨率将会达到原子分辨率，从而使电子显微学与X射线晶体学和核磁共振一起成为结构生物学研究的三大手段。
　　但是在很长的时间内，国内很少见到关于病毒电子显微学研究的书籍，就本人的印象，只有1961年高尚荫先生编写的《电子显微镜下的病毒》一书以及近年来几本有关病理学或分类学方面的书涉及这方面的一些内容。这与病毒学发展现状很不适应。作者长期从事病毒电子显微学的研究和教学工作，因此决定编写《病毒的电子显微学研究》一书。本书主要介绍研究病毒的电子显微学方法和取得的成果，可供结构生物学、病毒学、流行病学研究者和高等院校有关专业师生参考。
　　本书于2006年由中山大学生命科学学院电镜室的张景强、李鲲鹏、张勤奋、黄小俊、谭玉蓉、崔金明、陈森雄和柳正完成了初稿。由于初稿较粗糙及尚不够完整等原因未送出版社。2009年7月科学出版社来信征稿，于是我们决定在原来的基础上重新编写《病毒的电子显微学研究》-书。原来的部分作者（张勤奋、崔金明和陈森雄等）因种种原因无法继续参与本书编写，于是另邀请朱平、洪健和何键等同行参与重新编写。在此对张勤奋、崔金明和陈森雄等此前所作的努力和贡献表示衷心的感谢！北京大学丁明孝教授、南方医科大学朴英杰教授大力支持本书出版。同时，本书的出版得到国家自然科学基金（项目号U0832604）、科技部蛋白质重大专项（项目号2010CB912404），以及中国科学院百人计划（项目号KSCX2-YW-R-142）等的资助，在此深表谢意！
　　本书中所有的图除标明引用出处的外，其余均为作者所有。广东省微生物研究所何能波、中国科学院武汉病毒所张立人等为本书提供了很好的电镜照片，在此表示衷心感谢！
　　张景强
　　2010年10月
　　于中山大学
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