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硃道銀，吳玉章 著

圖書標籤:

• 免疫學
• 實驗
• 醫學
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• 科研
• 高等教育
• 教材
• 生物技術
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齣版社： 科學齣版社

ISBN：9787030219404

商品編碼：29662117479

包裝：平裝

齣版時間：2008-06-01

基本信息

書名：免疫學實驗

定價：26.00元

作者：硃道銀,吳玉章

齣版社：科學齣版社

齣版日期：2008-06-01

ISBN：9787030219404

字數：

頁碼：

版次：1

裝幀：平裝

開本：16開

商品重量：0.381kg

編輯推薦

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內容提要

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本書的編寫指導思想是打破傳統實驗教學模式，不受學生專業與層次的限製，以能力培養為主綫，推進學生自主學習、研究習。對實驗教學內容進行分類、整閤，形成瞭基礎實驗操作技術、經典驗證性實驗、綜閤性實驗、臨床免疫實驗、創新性實驗五篇，共27章，85個實驗。完全能夠滿足各層次、各專業免疫學教學的需求。在基礎實驗操作技術中介紹瞭現代免疫學常用方法技術，例如細胞培養、基因剋隆、動物模型的建立等，為創新性實驗提供瞭鋪墊。在創新性實驗中，提齣瞭有一定覆蓋麵和代錶性的設計選題範例或方嚮，寫作手法以啓迪思維為主，但不失指導性與示範性，體現瞭我們注重學生能力培養所做的探索。臨床免疫實驗中介紹瞭目前臨床常用的免疫學檢驗方法在疾病診斷、防治中的應用，例如微粒子酶免疫分析技術、電化學發光免疫測定、熒光偏振免疫測定法等。
本教材由教學經驗和實驗室經驗豐富的教師編寫，力求原理講解清楚，方法介紹明白，不少內容是作者的經驗之談。全書約32萬字，插圖57幅。適用於五年製、七年製各專業基礎免疫學和臨床免疫學實驗教學，也可供相關專業的教師、研究生以及從事臨床檢驗、衛生防疫、免疫學研究的實驗技術人員使用。

目錄

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篇 基本實驗操作技術
　章 血液標本的采集
　　實驗一 人血液標本的采集
　　實驗二 動物血液標本的采集及動物處死方法
　第2章 細胞計數及活性測定
　　實驗三 細胞計數的方法
　　實驗四 細胞活力測定
　第3章 細胞培養
　　實驗五 細胞培養用器材的準備與無菌操作
　　實驗六 原代細胞培養
　　實驗七 細胞傳代培養
　　實驗八 細胞的凍存與復蘇
　第4章 動物模型的建立
　　實驗九 免疫功能低下動物模型
　　實驗十 移植性腫瘤動物模型
　第5章　　實驗動物給藥方法
　　實驗十一　實驗動物的捉持與固定
　　實驗十二　實驗動物的給藥方法
　第6章 目的基因的剋隆與錶達
　　實驗十三 RT-PCR擴增小鼠IL-2基因
　　實驗十四 小鼠IL-2原核錶達質粒的構建
　　實驗十五 重組mIL-2的誘導錶達及SDS-PAGE鑒定
　　實驗十六 重組mIL-2的親閤層析純化及濃度測定
第二篇 經典驗證性實驗
　第7章 凝集反應
　　實驗十七 玻片凝集試驗
　　實驗十八 試管凝集試驗
　　實驗十九 間接凝集試驗
　　實驗二十 協同凝集試驗
　第8章 沉澱反應
　　實驗二十一 單嚮瓊脂擴散
　　實驗二十二 雙嚮瓊脂擴散
　　實驗二十三 對流免疫電泳
　　實驗二十四 免疫電泳
　　實驗二十五 火箭免疫電泳
　　實驗二十六 交叉免疫電泳
　　實驗二十七 免疫比濁
　第9章 補體參與的免疫反應
　　實驗二十八 溶血試驗
　　實驗二十九 血清總補體活性測定
　　實驗三十 補體依賴的細胞毒試驗
　第lO章 免疫標記技術
　　實驗三十一 酶聯免疫吸附試驗
　　實驗三十二 酶聯免疫斑點(EILISPOT)技術檢測淋巴細胞分泌活性
　　實驗三十三 間接免疫熒光法檢測人外周血T細胞亞群
　　實驗三十四 膠體金的製備
　　實驗三十五 免疫金的製備
　　實驗三十六 膠體金斑點層析技術檢測早期妊娠
　　實驗三十七 中性粒細胞吞噬功能的化學發光測定
　1章 免疫細胞的分離純化
　　實驗三十八 沉降法分離外周血白細胞
　　實驗三十九 密度梯度離心法分離外周血單個核細胞
　　實驗四十 小鼠脾細胞的製備
　　實驗四十一 小鼠胸腺細胞的製備
　　實驗四十二 小鼠骨髓樹突狀細胞的製備
　　實驗四十三 小鼠腹腔巨噬細胞的製備
　2章 吞噬細胞功能測定
　　實驗四十四 硝基四氮唑藍還原試驗
　　實驗四十五 細菌計數法測定中性粒細胞吞噬功能
　　實驗四十六 巨噬細胞吞噬功能測定
　　實驗四十七 中性粒細胞趨化功能測定
　3章 超敏反應
　　實驗四十八 豚鼠過敏反應
　　實驗四十九 皮膚速發型超敏反應
　　實驗五十 血清總IgE測定
　　實驗五十一 特異性IgE的測定
第三篇 綜閤性實驗
　4章 多剋隆抗體的製備
　　實驗五十二 免疫血清的製備
　　實驗五十三 免疫血清的鑒定與純化
　5章 單剋隆抗體的製備
　　實驗五十四 動物的選擇與免疫
　　實驗五十五 細胞融閤
　　實驗五十六 雜交瘤的篩選與剋隆
　　實驗五十七 單剋隆抗體的製備與鑒定
　　實驗五十八 單剋隆抗體Fab片段的製備
　6章 免疫印跡
　　實驗五十九 免疫印跡技術
　7章 免疫細胞檢測
　　實驗六十 溶血空斑試驗
　　實驗六十一 APAAP橋聯酶標法檢測T細胞亞群
　　實驗六十二 流式細胞術檢測T細胞亞群
　8章 免疫細胞功能檢測
　　實驗六十三 淋巴細胞增殖試驗
　　實驗六十四 混閤淋巴細胞反應
買驗六十五 NK細胞活性測定
　　實驗六十六 細胞毒性T淋巴細胞活性測定
　9章 細胞因子的檢測
　　實驗六十七 白細胞介素-2活性的檢測
　　實驗六十八 腫瘤壞死因子的生物學活性檢測
　第20章 細胞凋亡的檢測
　　實驗六十九 凝膠電泳法檢測小鼠胸腺細胞凋亡
　　實驗七十 末端脫氧核糖核苷酸轉移酶介導的缺口末端標記法檢測細胞凋亡
　　實驗七十一 流式細胞術檢測細胞凋亡
第四篇 臨床免疫實驗
　第21章 感染性疾病的免疫學檢測
　　實驗七十二 IgM捕獲法檢測TORCH感染特異性IgM抗體
　　實驗七十三 雙抗原夾心ELISA法檢測人類免疫缺陷病毒抗體
　　實驗七十四 ELISA法檢測乙型肝炎病毒抗原及特異性抗體
買驗七十五 IgM捕獲法檢測甲型肝炎病毒特異性IgM抗體
　第22章 腫瘤標誌物的檢測
買驗七十六 微粒子化學發光免疫法檢測甲胎蛋白
　　實驗七十七 微粒子化學發光免疫法檢測癌胚抗原
買驗七十八 微粒子化學發光免疫法檢測其他腫瘤相關抗原
　第23章 自身免疫性疾病的檢測
買驗七十九 斑點酶免疫法檢測抗ENA抗體
買驗八十 ELISA檢測抗甲狀腺球蛋白抗體
　第24章 內分泌疾病的免疫學檢測
　　實驗八十一 電化學發光免疫法檢測甲狀腺激素
　　實驗八十二 電化學發光免疫法檢測雌二醇
　第25章 血液藥物濃度的檢測
　　實驗八十三 熒光偏振免疫法測定血液環孢素濃度
　　實驗八十四 熒光偏振免疫法測定血液卡馬西平濃度
　　實驗八十五 微粒子酶免分析法測定血液地高辛濃度
第五篇 創新性實驗
　第26章　　實驗的選題、設計、實施與總結
　第27章 創新性實驗參考選題
附錄1 常用實驗儀器設備簡介
附錄2 常用試劑配製

作者介紹

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文摘

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序言

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現代免疫學研究方法與實踐 第一部分：免疫係統的基礎迴顧與實驗設計 本部分旨在為讀者搭建紮實的理論基礎，為後續的實驗操作做好鋪墊。我們將首先迴顧免疫係統的基本組成、關鍵細胞及其功能，包括但不限於T細胞、B細胞、巨噬細胞、樹突狀細胞等，以及它們在先天免疫和適應性免疫中的協同作用。我們將深入探討免疫應答的幾個核心環節，如抗原提呈、淋巴細胞的活化與分化、效應分子的産生以及免疫記憶的形成。同時，本部分還將引導讀者理解免疫係統在維持機體穩態、抵禦病原體入侵以及識彆並清除異常細胞（如腫瘤細胞）中的重要作用。 在理論基礎之上，我們將重點講解科學的實驗設計原則。這包括如何提齣一個具有研究價值的科學問題，如何將問題轉化為可操作的實驗假設，以及如何根據假設設計嚴謹的實驗方案。我們將詳細闡述對照組、實驗組的設置，變量的控製，以及樣本量的選擇等關鍵要素。此外，還將強調實驗結果的統計學分析方法，包括常用統計檢驗的選擇與解讀，以及如何有效地呈現和解釋實驗數據，以確保研究結論的科學性和可靠性。這一部分的學習將幫助讀者提升獨立思考和解決問題的能力，為開展高質量的免疫學研究奠定堅實基礎。 第二部分：免疫學核心實驗技術詳解 本部分將聚焦於免疫學研究中最常用、最核心的實驗技術，並提供詳盡的操作指南和原理說明。 細胞培養技術： 無菌操作技術： 嚴格遵循無菌操作規程是所有細胞培養實驗成功的基石。我們將詳細介紹超淨工作颱的使用、試劑和器具的滅菌方法、培養基的準備與更換、以及汙染的預防與處理。 原代細胞分離與培養： 學習如何從血液、淋巴組織（如脾髒、淋巴結）或骨髓中分離齣特定的免疫細胞群。包括密度梯度離心法、磁珠分選法（如MACS、FACS）等。我們將詳細介紹不同細胞類型（如淋巴細胞、單核細胞、粒細胞）的分離原理和操作步驟，以及優化培養條件以維持細胞活性和功能。 細胞係培養： 介紹常用免疫細胞係（如HeLa、Jurkat、RAW 264.7等）的培養、傳代、凍存和復蘇技術。強調不同細胞係對培養基、溫度、CO2濃度等環境的要求，以及如何維持細胞係的純度和遺傳穩定性。 細胞功能檢測： 介紹如何通過培養過程中的檢測來評估細胞活力（如MTT法、CCK-8法）、增殖能力（如BrdU摻入法）、以及凋亡情況（如Annexin V/PI染色法）。 免疫化學與分子生物學技術： 抗原製備與鑒定： 學習如何製備和純化重組蛋白、多肽抗原，以及如何通過SDS-PAGE、Western Blot等方法鑒定抗原的純度和分子量。 抗體製備與鑒定： 詳細介紹單剋隆抗體和多剋隆抗體的製備原理，包括動物免疫、雜交瘤技術、抗體純化等。同時，將介紹抗體效價測定、特異性鑒定等方法，確保抗體用於後續實驗的有效性。 Western Blotting（免疫印跡）： 作為檢測特定蛋白質錶達的經典技術，我們將詳細介紹其操作流程：樣本製備（總蛋白提取、膜蛋白提取）、SDS-PAGE電泳分離、轉膜（PVDF膜、NC膜）、封閉、一抗孵育、二抗孵育、顯色檢測。同時，還將介紹如何進行定量分析。 ELISA（酶聯免疫吸附測定）： 介紹ELISA的基本原理，包括競爭法、間接法、雙抗體夾心法等。詳細講解其在檢測抗體、抗原、細胞因子等方麵的應用，以及實驗流程、結果判讀與注意事項。 流式細胞術（Flow Cytometry, FC）： 深入闡述流式細胞術在單細胞水平分析細胞錶麵標誌物、胞內分子以及細胞物理特性（如大小、顆粒度）的原理。詳細介紹抗體標記（熒光染料選擇）、上樣、儀器操作、數據采集與分析（如門控策略、直方圖、散點圖解讀）。重點介紹其在免疫細胞鑒定、分選、增殖、凋亡、細胞周期等方麵的應用。 免疫熒光染色（Immunofluorescence, IF）： 介紹IF技術在可視化細胞內或細胞錶麵特定蛋白錶達的原理。詳細講解樣本製備（細胞爬片、組織切片）、固定、透化、一抗、二抗孵育、熒光顯微鏡觀察與圖像分析。 PCR（聚閤酶鏈式反應）與RT-PCR（逆轉錄-PCR）： 學習RT-PCR在檢測RNA錶達水平的原理，包括RNA提取、cDNA閤成、PCR擴增。詳細介紹引物設計、PCR反應條件優化、結果分析（如凝膠電泳）。 qPCR（定量PCR）： 介紹qPCR在精確量化基因錶達水平的優勢，包括 SYBR Green法和TaqMan探針法。講解反應體係構建、標準麯綫繪製、數據分析與結果解讀。 第三部分：免疫學功能性實驗與應用 本部分將重點介紹如何利用已掌握的實驗技術去深入研究免疫係統的功能，以及這些技術在實際應用中的價值。 細胞因子檢測與調控： 細胞因子檢測： 介紹利用ELISA、流式細胞術（胞內染色）、Luminex平颱等方法檢測細胞因子（如IL-2, IL-4, IFN-γ, TNF-α等）的錶達水平，以評估免疫細胞的功能狀態。 細胞因子對免疫細胞功能的影響： 設計實驗研究不同細胞因子對淋巴細胞增殖、分化、凋亡以及分泌其他細胞因子的影響。 細胞因子在疾病中的作用： 探討細胞因子在炎癥、感染、自身免疫病、腫瘤等疾病發生發展中的作用機製，並設計相應的實驗進行驗證。 細胞毒性免疫研究： 細胞殺傷實驗： 介紹如何利用51Cr釋放法、LDH釋放法、GFP/RFP標記靶細胞法等技術評估細胞毒性T淋巴細胞（CTLs）和自然殺傷細胞（NK cells）的殺傷活性。 細胞死亡機製研究： 結閤流式細胞術（Annexin V/PI染色）、Western Blot（caspase激活）、TUNEL染色等技術，研究細胞死亡的通路和機製。 抗體功能研究： 抗體介導的細胞毒性（ADCC）： 設計實驗檢測抗體誘導NK細胞或其他效應細胞殺傷靶細胞的能力。 補體依賴性細胞毒性（CDC）： 介紹如何通過檢測補體激活和靶細胞裂解來評估抗體介導的CDC活性。 疫苗研發與免疫應答評價： 動物模型建立： 介紹不同疾病模型（如感染模型、腫瘤模型、自身免疫病模型）的建立與應用。 抗體滴度檢測： 利用ELISA等方法檢測動物體內針對特定抗原産生的抗體水平，評估疫苗的免疫原性。 細胞免疫應答評估： 通過流式細胞術、IFN-γ ELISpot等方法檢測疫苗誘導的T細胞應答。 保護性免疫研究： 評估疫苗接種後動物對病原體攻擊的抵抗能力。 免疫抑製與免疫激活研究： 免疫檢查點分子研究： 利用流式細胞術、Western Blot等技術檢測PD-1, CTLA-4等免疫檢查點分子的錶達，並設計實驗研究其在腫瘤免疫逃逸中的作用。 免疫激活藥物的評估： 設計實驗評估新型免疫激活劑對免疫細胞功能的影響。 第四部分：數據分析、報告撰寫與倫理考量 本部分將指導讀者如何係統地整理、分析實驗數據，並將其有效地呈現齣來。 數據管理與整理： 強調規範記錄實驗過程、原始數據的重要性，以及如何利用電子錶格和專業統計軟件進行數據管理。 統計學分析進階： 深入講解t檢驗、方差分析（ANOVA）、卡方檢驗、相關性分析等常用統計方法的適用條件、操作步驟以及結果解讀。 圖錶製作與數據可視化： 介紹如何利用GraphPad Prism, R語言等工具製作科學、清晰的圖錶（如柱狀圖、摺綫圖、散點圖、箱綫圖等），以直觀地展示實驗結果。 實驗報告撰寫規範： 詳細講解科研論文的結構，包括題目、摘要、引言、材料與方法、結果、討論、參考文獻等各部分的撰寫要點，以及如何清晰、準確地描述實驗過程、展示數據和闡述研究結論。 學術誠信與倫理規範： 強調科研中的學術誠信原則，包括數據造假、剽竊等行為的危害。介紹實驗動物使用倫理、生物安全等相關法規與規範。 通過對以上各部分的深入學習和實踐，讀者將能夠係統地掌握現代免疫學研究的核心理論與實驗技術，能夠獨立設計和開展免疫學研究課題，並具備解讀和分析實驗結果的能力，為未來在免疫學領域的學習、研究或工作打下堅實的基礎。

評分☆☆☆☆☆

從一個實際使用者的角度來看，這本書在可操作性和實用性上達到瞭一個很高的平衡點。它的語言風格是那種典型的學術寫作，精準、客觀，幾乎沒有一句廢話，但奇怪的是，我卻絲毫沒有感到枯燥。這得益於其條理清晰的章節結構和對關鍵步驟的反復強調。每完成一個技術模塊的學習，書後附帶的“自測與反思”環節就顯得尤為重要，它迫使讀者迴顧剛剛學到的知識點，並思考其在實際操作中可能遇到的問題，這種主動學習的機製非常高效。而且，書中的一些插圖和圖錶設計，即便是作為輔助材料，也充滿瞭信息密度，比如那些關於不同免疫細胞分選的熒光通道設置錶格，直接就能拿來作為實驗準備的參考清單。總而言之，它不是那種隻適閤在圖書館裏翻閱的“大部頭”，而是真正能夠被帶進實驗室，被試劑和儀器打擾、被實驗數據檢驗的“工作伴侶”。它的價值，在實際操作中纔會愈發顯現。

評分☆☆☆☆☆

這本書的參考價值，從其引用的文獻和案例中就能窺見一斑。它顯然是建立在紮實的、前沿的科學文獻基礎之上的，這保證瞭其內容的權威性和時效性。更讓我驚喜的是，它並未完全沉溺於純理論的堆砌，而是非常巧妙地穿插瞭大量的“經典案例迴顧”和“前沿技術展望”。通過對曆史上的關鍵實驗的重述，比如解釋某個重要發現是如何通過特定的實驗設計實現的，不僅豐富瞭讀者的知識廣度，也拓寬瞭實驗思路。而在展望部分，作者對新興的單細胞測序技術在免疫學中的應用趨勢分析得鞭闢入裏，既肯定瞭技術的潛力，也客觀指齣瞭當前麵臨的挑戰，這使得這本書不僅僅是一本迴顧過去的操作手冊，更是一扇通往未來免疫學研究方嚮的窗口。這種將曆史、現狀與未來融閤的敘事手法，極大地激發瞭我對深入研究的渴望和對學科發展的信心。

評分☆☆☆☆☆

這本書的內容編排邏輯性之強，簡直是教科書級彆的典範。它不是簡單地羅列知識點，而是構建瞭一個層層遞進的知識體係框架。開篇的理論基礎部分，像是為後麵的實驗操作打下瞭堅實的理論地基，每一章的過渡都銜接得天衣無縫，從宏觀的免疫係統概述，自然而然地過渡到微觀的細胞相互作用機製，再到具體的分子檢測方法，節奏掌握得極為精準。我過去在學習類似主題時，常常因為理論和實踐的脫節感到睏惑，但這本書成功地將“為什麼這麼做”和“如何操作”緊密地結閤在瞭一起。每當介紹一個核心實驗技術時，作者都會先用一段話點明其背後的生物學原理，然後立刻跟進詳細的步驟分解，這極大地增強瞭學習的連貫性和目的性。即便是那些公認難度較高的技術，如流式細胞術的數據分析部分，也被拆解成瞭易於消化的步驟，配上詳盡的注意事項，讓人感覺即便是第一次接觸，也能心中有數，避免走彎路。

評分☆☆☆☆☆

我一直認為一本好的實驗指導書，其價值不僅僅在於傳授“如何做”，更在於教會讀者“如何思考”和“如何解決問題”。這本書在這方麵做得尤為齣色，體現瞭一種資深科研工作者的視角。它並沒有給齣“標準答案式”的操作指南，而是包含瞭大量的“變通和優化”的經驗之談。例如，在探討ELISA實驗時，它不僅詳細說明瞭包被、封閉、檢測的標準流程，還專門闢齣一個小節，深入分析瞭孔底孵育時間、抗體稀釋比對結果準確性的影響，並探討瞭在樣本濃度過高或過低時，應該采取哪些預處理或稀釋策略。這種對實驗細節的深度挖掘和對潛在誤差來源的預警，遠超齣瞭普通教材的範疇，更像是一位經驗豐富的導師在耳邊細細叮囑。閱讀這些內容時，我能真切地感受到作者對實驗科學嚴謹性的極緻追求，它培養的不是單純的“操作員”，而是能夠獨立思考實驗設計的“研究者”。

評分☆☆☆☆☆

這本書的裝幀設計著實讓人眼前一亮，那種沉穩中又不失細節的質感，初次上手時便帶來一種對知識的敬畏感。內頁的紙張選擇也相當考究，光潔度適中，即便是長時間的閱讀，眼睛也不會感到過分疲勞。我特彆欣賞它在圖文排版上的用心，那些復雜的分子結構圖和實驗流程示意圖，都被處理得清晰明瞭，綫條的粗細和色彩的搭配都經過瞭深思熟慮，有效地降低瞭初學者理解抽象概念的門檻。比如，在介紹細胞因子信號通路的那一章，作者沒有采用堆砌文字的方式，而是巧妙地用流程圖將各個關鍵蛋白的激活與抑製關係可視化，這對於我這種更偏愛視覺學習的人來說，簡直是福音。而且，書中的一些曆史背景介紹，穿插得恰到好處，讓原本枯燥的實驗技術在曆史的沉澱下顯得更有厚重感，仿佛在訴說著免疫學領域前輩們探索的艱辛與智慧。整體來說，這本書從觸感到視覺，都傳遞齣一種專業、嚴謹且充滿誠意的態度，讓人願意沉浸其中，細細品味每一個知識點。