精編蛋白質科學實驗指南

精編蛋白質科學實驗指南 pdf epub mobi txt 電子書 下載 2025

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  • 蛋白質結構
  • 蛋白質功能
  • 生物技術
  • 實驗操作
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店鋪: 文輝博庫專營店
齣版社: 科學齣版社
ISBN:9787030180865
商品編碼:25583504624
包裝:平裝
齣版時間:2007-01-01

具體描述

基本信息

書名:精編蛋白質科學實驗指南

:248.00元

作者: J.E.科林根 等;李慎濤 等

齣版社:科學齣版社

齣版日期:2007-01-01

ISBN:9787030180865

字數:

頁碼:752

版次:1

裝幀:平裝

開本:16開

商品重量:1.544kg

編輯推薦


內容提要


《精編蛋白質科學實驗指南》內容全部取材於該書和每季度更新的服務手冊,其詳細提供瞭多種實驗方案,並包含實驗材料、步驟和每種技術的參考文獻等信息,可使有經驗的研究人員將其作為獨立的實驗室指南來使用。
  由於蛋白質具有多樣性,其分析也必須包括很廣範的結構和理化方法,因此每個研究人員都必須盡可能多地掌握新方法和傳統方法。本指南中既包括特定的詳細方案,也包括使方法適應手頭特定項目的策略,相信能夠有助於讀者進一步深入進行蛋白質科學和相關領域的研究。

目錄


作者介紹


文摘


序言


譯者的話
前言
參編者
推薦的背景讀物

第1章 蛋白質純化和定性的策略
1.1 單元 蛋白質純化和定性概述
目標和研究對象
蛋白質純化的原料
蛋白質的檢測和分析
蛋白質分離和純化方法
蛋白質産物的定性
蛋白質純化實驗室
1.2 單元 蛋白質純化流程圖
可溶性重組蛋白
不可溶性重組蛋白
可溶性非重組蛋白
膜相關的和不可溶性重組蛋白

第2章 計算分析
2.1 單元 用於蛋白質序列分析的疏水分布圖
方法學
應用
結論
2.2 單元 蛋白質二級結構預測
二級結構預測的方法
二級結構預測方法的應用
2.3 單元 使用BLAST程序傢族進行序列相似性搜索
進入BLAST程序和文檔
BLAST介紹
BLAST程序
2.4 單元 因特網上的蛋白質數據庫
蛋白質結構數據庫
蛋白質傢族數據庫
2.5 單元 蛋白質三級結構預測
同源性建模
序列分布圖法
綫程法
從頭結構預測
2.6 單元 蛋白質三級結構建模
詞匯
進入SwissModel程序和文檔
ExPDB數據庫
創建法建模查詢的格式
觀看SwissModel結果
2.7 單元 比較蛋白質結構預測
比較建模的步驟

第3章 檢測和分析方法
3.1 單元 分光光度法確定蛋白質濃度
基本方案1 計算一個蛋白質的摩爾吸收係數
基本方案2 摺疊蛋白質摩爾吸收係數的測定
基本方案3 使用摩爾吸收係數通過吸收光譜測定蛋白質的濃度
基本方案4 通過205nm處的吸收光譜測定蛋白質的濃度
基本方案5 粗蛋白質提取液總蛋白質濃度的測定
3.2 單元 定量氨基酸分析
樣品製備
平均組成的計算
3.3 單元 肽和蛋白質的體外放射標記
基本方案1 使用碘珠對酪氨酸或組氨酸殘基進行碘化
備擇方案1 用氯胺T或Iodogen在酪氨酸或組氨酸殘基碘化
備擇方案2 使用乳酸過氧化物酶在酪氨酸或組氨酸殘基碘化
輔助方案1 等摩爾碘化以獲得産物的高收率
輔助方案2 用HPLC從碘化産物中分離未標記的肽
基本方案2 用Bolton-Hunter試劑在賴氨酸殘基或N端碘化
基本方案3 通過酸酐乙酰化在賴氨酸殘基或N端進行14C或3H標記
備擇方案3 通過還原性烷基化在賴氨酸殘基或N端進行14C或3H標記
備擇方案4 用碘乙酸或碘乙酰胺在賴氨酸殘基進行14C或3H標記
基本方案4 在肽閤成過程中引入標記的氨基酸殘基
備擇方案5 在肽閤成過程中在N端進行選擇性標記
3.4 單元 總蛋白質的分析
基本方案1 總蛋白質定量的雙縮脲分析
基本方案2 總蛋白質定量的Hartree-Lowry分析
基本方案3 總蛋白質定量的二喹啉甲酸(BCA)分析
基本方案4 總蛋白質定量的酸消化——茚三酮法
輔助方案1 熱封玻璃管
基本方案5 測量總蛋白質的考馬斯染料結閤分析(Bradford分析)
輔助方案2 蛋白質樣品的凝膠透析
……
第4章 提取、穩定和濃縮
第5章 重組蛋白的生産
第6章 重組蛋白的純化
第7章 重組蛋白的定性
第8章 常規層析分離
第9章 親和層析
第10章 電泳
第11章 化學分析
第12章 翻譯後修飾:糖基化
第13章 翻譯後修飾:磷酸化和磷酸酶
第14章 翻譯後修飾:特定的應用
第15章 蛋白質的化學修飾
第16章 質譜
第17章 肽的製備和處理
第18章 蛋白質互相作用的鑒定
第19章 蛋白質相互作用的定量
第20章 肽酶
第21章 基於凝膠的蛋白質組分析
附錄1 試劑和溶液
附錄2 常用的度量製和數據
附錄3 常用技術
附錄4 試劑和設備供貨商
參考文獻
索引


好的,這是一本關於植物分子生物學的專業書籍的詳細簡介。 --- 《植物分子生物學前沿技術與應用》 圖書簡介 《植物分子生物學前沿技術與應用》是一本深度聚焦於現代植物科學研究範式和尖端實驗方法的專業著作。本書旨在為植物學、生物技術、農業科學以及相關交叉學科的科研人員、研究生和高級本科生提供一個全麵、係統且實用的技術指導平颱。 在當前全球麵臨糧食安全、氣候變化以及生物資源可持續利用的重大挑戰背景下,對植物生命過程的分子機製進行深入理解和精準調控已成為核心科學命題。本書摒棄瞭傳統教科書對基礎概念的泛泛而談,轉而將筆墨聚焦於如何將理論知識轉化為可操作的、前沿的實驗技術,並探討這些技術在解決實際農業和生物學問題中的應用潛力。 全書結構與核心內容 全書共分為六個主要部分,由來自全球領先研究機構的資深專傢撰寫和審校,確保瞭內容的先進性、嚴謹性和可操作性。 第一部分:基因組學與轉錄組學的深度解析 本部分詳細闡述瞭植物基因組測序、組裝和注釋的最新策略,特彆是針對復雜、高倍度基因組(如禾本科作物)的挑戰性處理方法。重點介紹瞭長讀長測序技術(PacBio, Oxford Nanopore)在基因組結構變異鑒定和重復序列解析中的應用。 隨後,內容深入到轉錄組數據的深度挖掘。不僅涵蓋瞭標準RNA-seq的流程優化,還詳盡講解瞭單細胞轉錄組測序(scRNA-seq)在解析植物組織異質性,如根尖分生組織、花發育中的細胞類型特異性錶達模式上的應用指南。對空間轉錄組學(Spatial Transcriptomics)的原理和數據分析流程進行瞭詳盡的步驟解析,這是理解組織構建和信號傳遞空間維度的關鍵技術。 第二部分:蛋白質組學與代謝組學的動態調控網絡 理解生命活動的終極執行者——蛋白質的功能,需要精確的組學工具。本部分係統介紹瞭從植物組織中高效提取高質量蛋白質和代謝物的SOP(標準操作流程)。 在蛋白質組學方麵,著重介紹瞭高分辨質譜技術在磷酸化、糖基化等蛋白質翻譯後修飾(PTMs)的定性和定量分析中的應用。詳細闡述瞭如何利用Proximity Ligation-based Assays (PLA) 或 Co-immunoprecipitation (Co-IP) 結閤質譜來解析蛋白質-蛋白質相互作用(PPIs)網絡,尤其關注環境脅迫下信號網絡動態變化的研究案例。 代謝組學部分則聚焦於如何利用靶嚮和非靶嚮代謝物分析來揭示次生代謝産物(如生物堿、萜類化閤物)的生物閤成途徑和環境響應。 第三部分:先進的基因編輯與調控技術 基因編輯已成為現代植物生物學研究的基石。本書超越瞭基礎的CRISPR/Cas9係統,重點介紹瞭下一代基因編輯工具,包括堿基編輯器(Base Editors)和先導編輯器(Prime Editors)在植物基因組中的精確修飾策略。 更重要的是,本部分詳細講解瞭高通量正嚮遺傳學篩選係統,如使用T-DNA插入文庫和攜帶殺傷基因的誘變係統來快速鑒定關鍵基因。對於功能驗證,書中提供瞭利用CRISPRi/a進行快速基因功能“敲降”和“激活”的詳細實驗方案,這對於研究必需基因功能具有不可替代的價值。 第四部分:活體成像與生物物理學工具 深入理解動態過程,需要非破壞性的實時觀察技術。本部分是本書的亮點之一,提供瞭活體熒光成像技術的實操指南。 包括共聚焦顯微鏡的高級應用,如鈣離子成像(使用GCaMP等報告基因)來實時監測植物對光照、水勢和病原體攻擊的信號傳導。對於更宏觀的動態觀察,書中詳述瞭熒光蛋白標記係統(如GFP、mCherry)在組織特異性啓動子驅動下的構建和應用,以及如何利用延時攝影技術在田間或溫室環境下追蹤植物的生長發育指標。 第五部分:信號轉導與分子互作的體外/體內解析 本部分專注於細胞間和細胞內的分子通訊機製。重點介紹瞭酵母雙雜交(Y2H)的高效篩選策略,並對比瞭其在植物體係中應用(如SPLASH、Y2H-GO)的優勢與局限。 同時,書中提供瞭植物原生質體瞬時錶達係統的優化方案,這是快速驗證蛋白質亞細胞定位和早期功能互作的有效途徑。針對植物免疫研究,詳細闡述瞭如何構建農杆菌介導的瞬時錶達係統(Transient Expression)來研究病原體效應蛋白與宿主抗性蛋白的互作界麵。 第六部分:生物信息學與數據整閤的實踐 在海量組學數據時代,有效的生物信息學處理能力至關重要。本部分側重於實踐操作,而非理論推導。內容涵蓋瞭從原始數據(FASTQ, RAW MS)到可解釋生物學結論的完整分析流程。 提供瞭R/Bioconductor和Python腳本在處理差異錶達分析、基因共錶達網絡構建(WGCNA)中的實用案例。特彆強調瞭如何使用基於圖的機器學習方法整閤轉錄組、蛋白質組和代謝組數據,以構建更穩健的分子調控網絡模型,預測關鍵調控因子。 本書的特色與受眾 本書的顯著特點在於其“從方法論到應用實踐”的無縫銜接。每一項前沿技術都配有詳細的實驗流程圖、常見問題的故障排除(Troubleshooting)指南,以及基於真實數據的案例分析。它不僅僅是技術手冊,更是解決復雜生物學問題的思維導圖。 目標讀者群體: 植物分子生物學、遺傳育種及生物技術領域的研究生(碩士、博士):作為核心實驗方法參考手冊。 科研院所及高校的青年研究人員:用於快速掌握或驗證新的實驗平颱和技術。 農業和生物製藥行業的研發工程師:作為轉化研究的工具箱。 《植物分子生物學前沿技術與應用》的齣版,旨在加速植物科學研究的步伐,使研究者能夠更高效、更精準地探索生命奧秘,推動現代農業的可持續發展。

用戶評價

評分

說實話,我對這種“指南”類的書籍通常抱持著謹慎的態度,因為很多時候它們要麼過於理論化,要麼就是操作步驟寫得太簡略,根本無法真正指導實踐。但是,這本《精編蛋白質科學實驗指南》給我的感覺完全不同。它似乎找到瞭一個非常巧妙的平衡點——既有紮實的理論背景支撐,又非常貼近實驗室的實際操作需求。我注意到書中對一些關鍵技術的原理講解得非常透徹,不是那種生硬的教科書式語言,而是用一種非常生動、易於理解的方式娓喃道來,讓人在學習操作的同時,也能夠建立起對背後科學原理的深刻理解。這一點非常重要,因為隻有理解瞭“為什麼”這麼做,纔能在實驗中遇到突發狀況時靈活應對。此外,書中對試劑的配製、儀器的維護等“邊邊角角”的細節也都有詳細說明,這些往往是決定實驗成敗的關鍵因素,卻常常被其他書籍所忽略。這本書的用心程度可見一斑,絕對是實驗桌上不可多得的良伴。

評分

哇,拿到這本新書真是太驚喜瞭!雖然我還沒來得及細看,但光是這個裝幀和排版就讓人眼前一亮。封麵設計得很有現代感,色彩搭配和諧,讓人感覺這本書裏裝的知識一定很“新鮮”。從目錄上看,它涵蓋的範圍相當廣博,從基礎的分子生物學操作到一些前沿的蛋白質工程技術,似乎都給到瞭比較深入的探討。特彆是它對實驗流程的描述,我注意到有很多詳細的步驟分解和注意事項,這對於像我這樣剛剛踏入這個領域的新手來說,簡直是雪中送炭。我以前看文獻裏的實驗部分總是雲裏霧裏,總覺得少瞭點“人情味”和實際操作的細節,但這本書的結構和語言風格,讓人感覺就像是有一位經驗豐富的前輩在你旁邊手把手地教你。我尤其期待它在數據分析和結果解讀方麵的章節,希望能夠提供一些實用的技巧和案例分析,幫助我更好地理解那些復雜的數據圖錶。總的來說,這本書給我的第一印象是非常專業、全麵,並且非常注重實用性,讓人對未來的學習充滿期待。

評分

我一直覺得,好的實驗指南應該具備“前瞻性”,不能僅僅停留在已經被驗證瞭無數次的經典方法上。翻閱這本《精編蛋白質科學實驗指南》後,我發現它在這方麵做得相當到位。它不僅涵蓋瞭經典的蛋白質分離、純化和鑒定技術,還專門開闢瞭章節來介紹一些新興的蛋白質組學技術和計算模擬方法在實驗設計中的應用。這對於我們這些希望站在科研前沿的人來說,無疑是巨大的福音。我特彆留意瞭它關於蛋白質相互作用研究的章節,描述瞭從傳統的酵母雙雜交到更現代的錶麵等離子共振(SPR)等技術的原理和操作要點。這種“古今結閤,軟硬兼施”的編排思路,使得這本書的適用範圍大大拓寬,不僅能指導日常的分子生物學工作,還能幫助我們規劃更具創新性的研究項目。它更像是一本能夠陪伴研究者長期成長的工具書,而不是一次性的參考資料。

評分

從一個長期與實驗打交道的人的角度來看,這本書最讓我欣賞的一點是它對“實驗的嚴謹性”和“安全規範”的強調。在很多非正式的指南中,安全注意事項往往隻是一筆帶過,但在這本書裏,無論是化學試劑的處理、生物廢棄物的處置,還是高風險操作的預防措施,都有非常詳盡和嚴肅的論述。這不僅是對讀者自身的保護,更是對整個科研環境負責任的錶現。此外,它在不同實驗步驟中穿插的“質量控製”要點也做得非常細緻,比如如何判斷純化柱是否平衡到位,如何評估抗體批次間的差異等,這些都是隻有經曆過無數次失敗纔能總結齣來的寶貴經驗。這些經驗的總結和提煉,使得這本書的價值遠遠超齣瞭簡單的“操作手冊”,它更像是一部沉澱瞭多年實驗室智慧的“實戰心法”,讀完之後,我對未來實驗的信心又足瞭不少。

評分

這本書的排版和易讀性簡直是教科書級彆的典範。我是一個比較注重閱讀體驗的人,如果一本書文字密集、圖錶晦澀難懂,我可能很快就會産生畏難情緒。然而,這本指南在視覺設計上做得非常齣色,大量的插圖、流程圖和錶格被巧妙地穿插在文字描述中,極大地提高瞭閱讀效率。那些復雜的概念和操作步驟,通過清晰的圖示一下子就變得直觀多瞭。而且,它的章節劃分邏輯性很強,從基礎準備到進階應用,層層遞進,非常符閤學習的認知規律。我甚至覺得,即便是對於那些已經有些經驗的研究者來說,這本書也能作為一個極好的“速查手冊”來使用,需要查找某個特定實驗的優化條件或故障排除方法時,可以迅速定位。這種對讀者體驗的關注,體現瞭編者對知識傳播的深度思考,而不是僅僅堆砌信息。

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