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出版社： 科学出版社

ISBN：9787030180865

商品编码：25583504624

包装：平装

出版时间：2007-01-01

基本信息

书名：精编蛋白质科学实验指南

：248.00元

作者： J.E.科林根 等；李慎涛 等

出版社：科学出版社

出版日期：2007-01-01

ISBN：9787030180865

字数：

页码：752

版次：1

装帧：平装

开本：16开

商品重量：1.544kg

编辑推荐

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内容提要

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《精编蛋白质科学实验指南》内容全部取材于该书和每季度更新的服务手册，其详细提供了多种实验方案，并包含实验材料、步骤和每种技术的参考文献等信息，可使有经验的研究人员将其作为独立的实验室指南来使用。
　　由于蛋白质具有多样性，其分析也必须包括很广范的结构和理化方法，因此每个研究人员都必须尽可能多地掌握新方法和传统方法。本指南中既包括特定的详细方案，也包括使方法适应手头特定项目的策略，相信能够有助于读者进一步深入进行蛋白质科学和相关领域的研究。

目录

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作者介绍

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文摘

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序言

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译者的话
前言
参编者
推荐的背景读物

第1章 蛋白质纯化和定性的策略
1．1 单元 蛋白质纯化和定性概述
目标和研究对象
蛋白质纯化的原料
蛋白质的检测和分析
蛋白质分离和纯化方法
蛋白质产物的定性
蛋白质纯化实验室
1．2 单元 蛋白质纯化流程图
可溶性重组蛋白
不可溶性重组蛋白
可溶性非重组蛋白
膜相关的和不可溶性重组蛋白

第2章 计算分析
2．1 单元 用于蛋白质序列分析的疏水分布图
方法学
应用
结论
2．2 单元 蛋白质二级结构预测
二级结构预测的方法
二级结构预测方法的应用
2．3 单元 使用BLAST程序家族进行序列相似性搜索
进入BLAST程序和文档
BLAST介绍
BLAST程序
2．4 单元 因特网上的蛋白质数据库
蛋白质结构数据库
蛋白质家族数据库
2．5 单元 蛋白质三级结构预测
同源性建模
序列分布图法
线程法
从头结构预测
2．6 单元 蛋白质三级结构建模
词汇
进入SwissModel程序和文档
ExPDB数据库
创建法建模查询的格式
观看SwissModel结果
2．7 单元 比较蛋白质结构预测
比较建模的步骤

第3章 检测和分析方法
3．1 单元 分光光度法确定蛋白质浓度
基本方案1 计算一个蛋白质的摩尔吸收系数
基本方案2 折叠蛋白质摩尔吸收系数的测定
基本方案3 使用摩尔吸收系数通过吸收光谱测定蛋白质的浓度
基本方案4 通过205nm处的吸收光谱测定蛋白质的浓度
基本方案5 粗蛋白质提取液总蛋白质浓度的测定
3．2 单元 定量氨基酸分析
样品制备
平均组成的计算
3．3 单元 肽和蛋白质的体外放射标记
基本方案1 使用碘珠对酪氨酸或组氨酸残基进行碘化
备择方案1 用氯胺T或Iodogen在酪氨酸或组氨酸残基碘化
备择方案2 使用乳酸过氧化物酶在酪氨酸或组氨酸残基碘化
辅助方案1 等摩尔碘化以获得产物的高收率
辅助方案2 用HPLC从碘化产物中分离未标记的肽
基本方案2 用Bolton-Hunter试剂在赖氨酸残基或N端碘化
基本方案3 通过酸酐乙酰化在赖氨酸残基或N端进行14C或3H标记
备择方案3 通过还原性烷基化在赖氨酸残基或N端进行14C或3H标记
备择方案4 用碘乙酸或碘乙酰胺在赖氨酸残基进行14C或3H标记
基本方案4 在肽合成过程中引入标记的氨基酸残基
备择方案5 在肽合成过程中在N端进行选择性标记
3．4 单元 总蛋白质的分析
基本方案1 总蛋白质定量的双缩脲分析
基本方案2 总蛋白质定量的Hartree-Lowry分析
基本方案3 总蛋白质定量的二喹啉甲酸（BCA）分析
基本方案4 总蛋白质定量的酸消化——茚三酮法
辅助方案1 热封玻璃管
基本方案5 测量总蛋白质的考马斯染料结合分析（Bradford分析）
辅助方案2 蛋白质样品的凝胶透析
……
第4章 提取、稳定和浓缩
第5章 重组蛋白的生产
第6章 重组蛋白的纯化
第7章 重组蛋白的定性
第8章 常规层析分离
第9章 亲和层析
第10章 电泳
第11章 化学分析
第12章 翻译后修饰：糖基化
第13章 翻译后修饰：磷酸化和磷酸酶
第14章 翻译后修饰：特定的应用
第15章 蛋白质的化学修饰
第16章 质谱
第17章 肽的制备和处理
第18章 蛋白质互相作用的鉴定
第19章 蛋白质相互作用的定量
第20章 肽酶
第21章 基于凝胶的蛋白质组分析
附录1 试剂和溶液
附录2 常用的度量制和数据
附录3 常用技术
附录4 试剂和设备供货商
参考文献
索引

好的，这是一本关于植物分子生物学的专业书籍的详细简介。 --- 《植物分子生物学前沿技术与应用》 图书简介 《植物分子生物学前沿技术与应用》是一本深度聚焦于现代植物科学研究范式和尖端实验方法的专业著作。本书旨在为植物学、生物技术、农业科学以及相关交叉学科的科研人员、研究生和高级本科生提供一个全面、系统且实用的技术指导平台。 在当前全球面临粮食安全、气候变化以及生物资源可持续利用的重大挑战背景下，对植物生命过程的分子机制进行深入理解和精准调控已成为核心科学命题。本书摒弃了传统教科书对基础概念的泛泛而谈，转而将笔墨聚焦于如何将理论知识转化为可操作的、前沿的实验技术，并探讨这些技术在解决实际农业和生物学问题中的应用潜力。 全书结构与核心内容 全书共分为六个主要部分，由来自全球领先研究机构的资深专家撰写和审校，确保了内容的先进性、严谨性和可操作性。 第一部分：基因组学与转录组学的深度解析 本部分详细阐述了植物基因组测序、组装和注释的最新策略，特别是针对复杂、高倍度基因组（如禾本科作物）的挑战性处理方法。重点介绍了长读长测序技术（PacBio, Oxford Nanopore）在基因组结构变异鉴定和重复序列解析中的应用。 随后，内容深入到转录组数据的深度挖掘。不仅涵盖了标准RNA-seq的流程优化，还详尽讲解了单细胞转录组测序（scRNA-seq）在解析植物组织异质性，如根尖分生组织、花发育中的细胞类型特异性表达模式上的应用指南。对空间转录组学（Spatial Transcriptomics）的原理和数据分析流程进行了详尽的步骤解析，这是理解组织构建和信号传递空间维度的关键技术。 第二部分：蛋白质组学与代谢组学的动态调控网络 理解生命活动的终极执行者——蛋白质的功能，需要精确的组学工具。本部分系统介绍了从植物组织中高效提取高质量蛋白质和代谢物的SOP（标准操作流程）。 在蛋白质组学方面，着重介绍了高分辨质谱技术在磷酸化、糖基化等蛋白质翻译后修饰（PTMs）的定性和定量分析中的应用。详细阐述了如何利用Proximity Ligation-based Assays (PLA) 或 Co-immunoprecipitation (Co-IP) 结合质谱来解析蛋白质-蛋白质相互作用（PPIs）网络，尤其关注环境胁迫下信号网络动态变化的研究案例。 代谢组学部分则聚焦于如何利用靶向和非靶向代谢物分析来揭示次生代谢产物（如生物碱、萜类化合物）的生物合成途径和环境响应。 第三部分：先进的基因编辑与调控技术 基因编辑已成为现代植物生物学研究的基石。本书超越了基础的CRISPR/Cas9系统，重点介绍了下一代基因编辑工具，包括碱基编辑器（Base Editors）和先导编辑器（Prime Editors）在植物基因组中的精确修饰策略。 更重要的是，本部分详细讲解了高通量正向遗传学筛选系统，如使用T-DNA插入文库和携带杀伤基因的诱变系统来快速鉴定关键基因。对于功能验证，书中提供了利用CRISPRi/a进行快速基因功能“敲降”和“激活”的详细实验方案，这对于研究必需基因功能具有不可替代的价值。 第四部分：活体成像与生物物理学工具 深入理解动态过程，需要非破坏性的实时观察技术。本部分是本书的亮点之一，提供了活体荧光成像技术的实操指南。 包括共聚焦显微镜的高级应用，如钙离子成像（使用GCaMP等报告基因）来实时监测植物对光照、水势和病原体攻击的信号传导。对于更宏观的动态观察，书中详述了荧光蛋白标记系统（如GFP、mCherry）在组织特异性启动子驱动下的构建和应用，以及如何利用延时摄影技术在田间或温室环境下追踪植物的生长发育指标。 第五部分：信号转导与分子互作的体外/体内解析 本部分专注于细胞间和细胞内的分子通讯机制。重点介绍了酵母双杂交（Y2H）的高效筛选策略，并对比了其在植物体系中应用（如SPLASH、Y2H-GO）的优势与局限。 同时，书中提供了植物原生质体瞬时表达系统的优化方案，这是快速验证蛋白质亚细胞定位和早期功能互作的有效途径。针对植物免疫研究，详细阐述了如何构建农杆菌介导的瞬时表达系统（Transient Expression）来研究病原体效应蛋白与宿主抗性蛋白的互作界面。 第六部分：生物信息学与数据整合的实践 在海量组学数据时代，有效的生物信息学处理能力至关重要。本部分侧重于实践操作，而非理论推导。内容涵盖了从原始数据（FASTQ, RAW MS）到可解释生物学结论的完整分析流程。 提供了R/Bioconductor和Python脚本在处理差异表达分析、基因共表达网络构建（WGCNA）中的实用案例。特别强调了如何使用基于图的机器学习方法整合转录组、蛋白质组和代谢组数据，以构建更稳健的分子调控网络模型，预测关键调控因子。 本书的特色与受众 本书的显著特点在于其“从方法论到应用实践”的无缝衔接。每一项前沿技术都配有详细的实验流程图、常见问题的故障排除（Troubleshooting）指南，以及基于真实数据的案例分析。它不仅仅是技术手册，更是解决复杂生物学问题的思维导图。 目标读者群体： 植物分子生物学、遗传育种及生物技术领域的研究生（硕士、博士）：作为核心实验方法参考手册。 科研院所及高校的青年研究人员：用于快速掌握或验证新的实验平台和技术。 农业和生物制药行业的研发工程师：作为转化研究的工具箱。 《植物分子生物学前沿技术与应用》的出版，旨在加速植物科学研究的步伐，使研究者能够更高效、更精准地探索生命奥秘，推动现代农业的可持续发展。

评分☆☆☆☆☆

我一直觉得，好的实验指南应该具备“前瞻性”，不能仅仅停留在已经被验证了无数次的经典方法上。翻阅这本《精编蛋白质科学实验指南》后，我发现它在这方面做得相当到位。它不仅涵盖了经典的蛋白质分离、纯化和鉴定技术，还专门开辟了章节来介绍一些新兴的蛋白质组学技术和计算模拟方法在实验设计中的应用。这对于我们这些希望站在科研前沿的人来说，无疑是巨大的福音。我特别留意了它关于蛋白质相互作用研究的章节，描述了从传统的酵母双杂交到更现代的表面等离子共振（SPR）等技术的原理和操作要点。这种“古今结合，软硬兼施”的编排思路，使得这本书的适用范围大大拓宽，不仅能指导日常的分子生物学工作，还能帮助我们规划更具创新性的研究项目。它更像是一本能够陪伴研究者长期成长的工具书，而不是一次性的参考资料。

评分☆☆☆☆☆

这本书的排版和易读性简直是教科书级别的典范。我是一个比较注重阅读体验的人，如果一本书文字密集、图表晦涩难懂，我可能很快就会产生畏难情绪。然而，这本指南在视觉设计上做得非常出色，大量的插图、流程图和表格被巧妙地穿插在文字描述中，极大地提高了阅读效率。那些复杂的概念和操作步骤，通过清晰的图示一下子就变得直观多了。而且，它的章节划分逻辑性很强，从基础准备到进阶应用，层层递进，非常符合学习的认知规律。我甚至觉得，即便是对于那些已经有些经验的研究者来说，这本书也能作为一个极好的“速查手册”来使用，需要查找某个特定实验的优化条件或故障排除方法时，可以迅速定位。这种对读者体验的关注，体现了编者对知识传播的深度思考，而不是仅仅堆砌信息。

评分☆☆☆☆☆

哇，拿到这本新书真是太惊喜了！虽然我还没来得及细看，但光是这个装帧和排版就让人眼前一亮。封面设计得很有现代感，色彩搭配和谐，让人感觉这本书里装的知识一定很“新鲜”。从目录上看，它涵盖的范围相当广博，从基础的分子生物学操作到一些前沿的蛋白质工程技术，似乎都给到了比较深入的探讨。特别是它对实验流程的描述，我注意到有很多详细的步骤分解和注意事项，这对于像我这样刚刚踏入这个领域的新手来说，简直是雪中送炭。我以前看文献里的实验部分总是云里雾里，总觉得少了点“人情味”和实际操作的细节，但这本书的结构和语言风格，让人感觉就像是有一位经验丰富的前辈在你旁边手把手地教你。我尤其期待它在数据分析和结果解读方面的章节，希望能够提供一些实用的技巧和案例分析，帮助我更好地理解那些复杂的数据图表。总的来说，这本书给我的第一印象是非常专业、全面，并且非常注重实用性，让人对未来的学习充满期待。

评分☆☆☆☆☆

从一个长期与实验打交道的人的角度来看，这本书最让我欣赏的一点是它对“实验的严谨性”和“安全规范”的强调。在很多非正式的指南中，安全注意事项往往只是一笔带过，但在这本书里，无论是化学试剂的处理、生物废弃物的处置，还是高风险操作的预防措施，都有非常详尽和严肃的论述。这不仅是对读者自身的保护，更是对整个科研环境负责任的表现。此外，它在不同实验步骤中穿插的“质量控制”要点也做得非常细致，比如如何判断纯化柱是否平衡到位，如何评估抗体批次间的差异等，这些都是只有经历过无数次失败才能总结出来的宝贵经验。这些经验的总结和提炼，使得这本书的价值远远超出了简单的“操作手册”，它更像是一部沉淀了多年实验室智慧的“实战心法”，读完之后，我对未来实验的信心又足了不少。

评分☆☆☆☆☆

说实话，我对这种“指南”类的书籍通常抱持着谨慎的态度，因为很多时候它们要么过于理论化，要么就是操作步骤写得太简略，根本无法真正指导实践。但是，这本《精编蛋白质科学实验指南》给我的感觉完全不同。它似乎找到了一个非常巧妙的平衡点——既有扎实的理论背景支撑，又非常贴近实验室的实际操作需求。我注意到书中对一些关键技术的原理讲解得非常透彻，不是那种生硬的教科书式语言，而是用一种非常生动、易于理解的方式娓喃道来，让人在学习操作的同时，也能够建立起对背后科学原理的深刻理解。这一点非常重要，因为只有理解了“为什么”这么做，才能在实验中遇到突发状况时灵活应对。此外，书中对试剂的配制、仪器的维护等“边边角角”的细节也都有详细说明，这些往往是决定实验成败的关键因素，却常常被其他书籍所忽略。这本书的用心程度可见一斑，绝对是实验桌上不可多得的良伴。