作为一名在高校生物技术专业即将毕业的本科生,我一直渴望能够将课堂上学到的理论知识与实际的实验操作相结合。《生命科学实验指南系列:植物蛋白质组学实验指南》这本书,恰好满足了我这一需求。我最先被书中关于蛋白质分离纯化技术的部分所吸引。书中详细介绍了 SDS-PAGE、二维电泳、亲和层析、离子交换层析等多种常用的蛋白质分离方法,并且针对植物特有的复杂基质,给出了许多优化实验条件和解决常见问题的实用技巧。例如,在处理植物细胞壁时,书中提供了几种不同的酶解方案,并详细说明了每种方案的适用范围和潜在风险,这让我觉得非常贴心。我还特别留意了书中关于胶体保护和染色技术的讲解,从 Coomassie 亮蓝染色到银染,再到荧光染色,都配有详细的步骤和图片,并且对各种染色的灵敏度和特异性进行了比较,这让我能够根据自己的研究需求选择最合适的染色方法。另外,书中还强调了实验过程中的安全事项和废弃物处理规范,这对于我们初学者来说是至关重要的。通过学习这本书,我不仅掌握了蛋白质分离和鉴定的基本技术,更重要的是,我学会了如何系统地思考和设计实验,这对我未来的科研道路打下了坚实的基础。
评分我在大学期间参与了一个关于植物生长调控因子的项目,导师推荐我参考《生命科学实验指南系列:植物蛋白质组学实验指南》来完成蛋白质鉴定部分的工作。我最先被书中关于蛋白质提取和纯化的几个案例研究所吸引。作者选取了不同来源的植物材料,详细阐述了针对这些材料设计的特异性提取和纯化方案,并对每一步的关键参数进行了细致的说明和解释。例如,书中在处理富含酚类物质的植物组织时,提供了多种去除酚类物质的策略,包括使用 PVA 聚合物、不同 pH 值的缓冲液,甚至是通过植物组织预处理等方法,这让我觉得非常实用。我特别喜欢书中在介绍实验方法时,总是会附带一些“常见问题及解决方法”的小贴士,这大大降低了我们初学者在实验过程中遇到困难的概率。书中对于不同蛋白质组学平台(如 MALDI-TOF/TOF、ESI-Orbitrap等)的性能特点和应用范围也进行了清晰的介绍,并针对植物蛋白质组学研究的特点,给出了选择合适平台的建议。这本书不仅仅是一本操作手册,更像是一位经验丰富的导师,它能够引导我们从宏观上理解整个实验流程,并在微观上解决遇到的每一个具体问题。
评分我是一名在某生物科技公司从事产品研发的资深工程师,我们公司一直在生物医药领域探索新的靶点和通路,其中植物来源的活性蛋白一直是我们的关注重点。《生命科学实验指南系列:植物蛋白质组学实验指南》这本书,为我们在探索植物蛋白功能和应用方面提供了宝贵的参考。我非常欣赏书中关于高通量筛选和自动化实验设计的理念。书中介绍了如何利用微流控技术和高密度芯片进行大规模的蛋白质筛选,以及如何通过机器人自动化平台来提高实验效率和可重复性。虽然这些技术可能在我们日常实验室中不是最常用的,但了解其原理和应用前景,对于我们把握行业前沿趋势非常有益。我特别关注书中关于数据库构建和信息学分析的章节。作者详细介绍了如何从公共数据库中提取植物基因组和蛋白质序列信息,如何利用生物信息学工具进行序列比对、功能预测和网络分析。书中还提供了一些常用的蛋白质组学数据分析软件的介绍和使用教程,这对于我们快速地从海量数据中挖掘有价值的信息至关重要。这本书的深度和广度都让我印象深刻,它不仅涵盖了基础的实验操作,更触及了前沿的研究方法和技术,为我们进行更深入的植物蛋白研究提供了强大的技术支撑。
评分我是一名在科研院所从事植物生理学研究多年的副研究员,一直以来都对蛋白质组学的研究方法抱有浓厚的兴趣,但苦于没有系统性的实验指导。这次有幸接触到《生命科学实验指南系列:植物蛋白质组学实验指南》,我尝试性地阅读了其中关于蛋白质鉴定和定量分析的部分。这本书对于质谱分析的原理和技术进行了深入浅出的讲解,让我对De novo测序、数据库搜索等方法有了更清晰的认识。我特别喜欢书中关于数据分析策略的讨论,作者详细阐述了如何选择合适的数据库,如何设置搜索参数以提高鉴定效率和准确性,以及如何进行差异蛋白分析和富集分析。其中关于蛋白质翻译后修饰(PTM)的研究部分,更是让我眼前一亮。书中不仅介绍了磷酸化、糖基化等常见的PTM,还提供了相应的富集策略和质谱分析方法,这对于我们研究植物在逆境胁迫下的信号转导机制非常有帮助。此外,书中还对不同定量策略(如iTRAQ、TMT、Label-free)的优缺点进行了比较分析,并给出了在不同研究场景下如何选择最合适定量方法的建议。我个人认为,这本书最大的亮点在于它不仅仅是罗列实验步骤,而是深入到实验设计的哲学层面,引导读者思考“为什么这样做”以及“如何做得更好”,这对于提升实验人员的科研素养至关重要。
评分作为一名初涉植物蛋白质组学领域的博士生,我怀着忐忑又兴奋的心情翻开了这本《生命科学实验指南系列:植物蛋白质组学实验指南》。初次拿到这本书,我的第一感觉就是它的专业性极强,封面设计简洁大气,书本本身的质感也十分不错,厚实的分量预示着内容的翔实。我特别关注了书中关于样本准备的部分,因为这通常是影响后续实验结果的关键一步。书中对不同植物组织(如叶片、根、种子)的采摘、保存、研磨以及细胞裂解等环节都进行了细致的描述,并且针对不同植物类型和研究目的,给出了多种优化方案和注意事项,这一点对于新手来说简直是福音。我尤其对其中关于如何最大限度地减少蛋白降解和修饰的章节印象深刻,作者列举了多种常用的蛋白酶抑制剂混合物以及它们的最佳使用浓度和条件,还提供了不同裂解缓冲液的配方和适用范围,这让我觉得书中的内容是经过反复实践验证的,非常具有指导意义。另外,书中在起始步骤就强调了前处理的重要性,比如去除干扰性物质,这在我之前的学习中是比较模糊的概念,而这本书则给出了具体的实验操作流程和相应的对照实验设计,让我能更清晰地理解每一步的原理和目的。这本书的结构安排也十分合理,从基础的实验设计理念到具体的实验操作步骤,层层递进,条理清晰,让我能够循序渐进地掌握植物蛋白质组学的实验技术。
评分《生命科学实验指南系列:植物蛋白质组学实验指南》由国际植物蛋白质组学研究领域的数位专家合作编写而成,系统介绍了植物细胞总蛋白、细胞器蛋白的分离提取,蛋白质的修饰,经典的蛋白质双向电泳、质谱技术等植物蛋白质组学研究的常用技术方法。对实验流程的描述简洁易懂,并配有实例,同时对关键步骤做了特别注释,无论对教学还是科研都有很高的参考价值。
评分在同一组发表的两篇文献中拟南芥悬浮细胞的匀浆液也被用来作为一个细胞壁蛋白质的来源[12,13]。在这两种情况下,细胞洗涤、过滤,并通过细胞破坏器。这些匀浆在甘油溶液中被分层并且通过重力沉淀后细胞壁组分被收集和洗涤。纯化的细胞壁由电子显微镜检查并且通过免疫荧光和免疫杂交检测污染的胞内或膜蛋白[12]。结果支持了作者的结论:细胞壁组分没有污染的蛋白质。在这两个文件中,细胞壁组分中的蛋白质先用0.2mol/L氯化钙提取然后用尿素缓冲液。
评分沈世华,中国科学院植物研究所研究员,博士生导师。兼任中国科学院唐山高新技术研发与转化中心工程植物事业部部长,中国植物生理学会植物生物质与生物能源专业委员会委员。
评分已经从挪威云杉木质部悬浮培养的活细胞中提取了细胞壁的蛋白质。通过在1mol/L氯化钠的缓冲液中孵育的方法将细胞壁蛋白质从经过过滤和洗涤的细胞中洗脱下来。分离的细胞进行匀浆,随之蛋白质被释放,但在离子作壁蛋白质中纯化出了与延伸相关的细胞壁蛋白质[17洗脱细胞壁的蛋白质。通过离子交换,氯化钙与结合蛋
评分《生命科学实验指南系列:植物蛋白质组学实验指南》由国际植物蛋白质组学研究领域的数位专家合作编写而成,系统介绍了植物细胞总蛋白、细胞器蛋白的分离提取,蛋白质的修饰,经典的蛋白质双向电泳、质谱技术等植物蛋白质组学研究的常用技术方法。对实验流程的描述简洁易懂,并配有实例,同时对关键步骤做了特别注释,无论对教学还是科研都有很高的参考价值。
评分正如所有的亚细胞的蛋白质组学研究,提取细胞壁蛋白质组的关键因素是提取的蛋白质片段不能被来自细胞其他部位的蛋白质污染。通常情况下用两种方法来分离细胞壁细胞壁的蛋白质。非破裂和破裂蛋白质提取两种方法各自有其优缺点,特别是有关蛋白质污染和改进当前的提取方法。第二个重要方面是多糖多酚类污染物的清除,它们在双向电泳中产生不良作用。过去,细胞培养为细胞壁蛋白质的提取提供了均一并且相对“干净”的组织来源。虽然分化的组织在生物学研究上相关性更强,但是研究起来更加复杂和困难,目前对于这些组织的大规模的蛋白质组的成果相对比较新。本章简单总结现有细胞壁蛋白质提取方法并且描述一种从紫花苜蓿茎中提取细胞壁蛋白质的具体方法。
评分沈世华,中国科学院植物研究所研究员,博士生导师。兼任中国科学院唐山高新技术研发与转化中心工程植物事业部部长,中国植物生理学会植物生物质与生物能源专业委员会委员。
评分速度很快
评分在同一组发表的两篇文献中拟南芥悬浮细胞的匀浆液也被用来作为一个细胞壁蛋白质的来源[12,13]。在这两种情况下,细胞洗涤、过滤,并通过细胞破坏器。这些匀浆在甘油溶液中被分层并且通过重力沉淀后细胞壁组分被收集和洗涤。纯化的细胞壁由电子显微镜检查并且通过免疫荧光和免疫杂交检测污染的胞内或膜蛋白[12]。结果支持了作者的结论:细胞壁组分没有污染的蛋白质。在这两个文件中,细胞壁组分中的蛋白质先用0.2mol/L氯化钙提取然后用尿素缓冲液。
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