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朱道银，吴玉章 著

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出版社： 科学出版社

ISBN：9787030219404

商品编码：29662117479

包装：平装

出版时间：2008-06-01

基本信息

书名：免疫学实验

定价：26.00元

作者：朱道银,吴玉章

出版社：科学出版社

出版日期：2008-06-01

ISBN：9787030219404

字数：

页码：

版次：1

装帧：平装

开本：16开

商品重量：0.381kg

编辑推荐

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内容提要

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本书的编写指导思想是打破传统实验教学模式，不受学生专业与层次的限制，以能力培养为主线，推进学生自主学习、研究习。对实验教学内容进行分类、整合，形成了基础实验操作技术、经典验证性实验、综合性实验、临床免疫实验、创新性实验五篇，共27章，85个实验。完全能够满足各层次、各专业免疫学教学的需求。在基础实验操作技术中介绍了现代免疫学常用方法技术，例如细胞培养、基因克隆、动物模型的建立等，为创新性实验提供了铺垫。在创新性实验中，提出了有一定覆盖面和代表性的设计选题范例或方向，写作手法以启迪思维为主，但不失指导性与示范性，体现了我们注重学生能力培养所做的探索。临床免疫实验中介绍了目前临床常用的免疫学检验方法在疾病诊断、防治中的应用，例如微粒子酶免疫分析技术、电化学发光免疫测定、荧光偏振免疫测定法等。
本教材由教学经验和实验室经验丰富的教师编写，力求原理讲解清楚，方法介绍明白，不少内容是作者的经验之谈。全书约32万字，插图57幅。适用于五年制、七年制各专业基础免疫学和临床免疫学实验教学，也可供相关专业的教师、研究生以及从事临床检验、卫生防疫、免疫学研究的实验技术人员使用。

目录

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篇 基本实验操作技术
　章 血液标本的采集
　　实验一 人血液标本的采集
　　实验二 动物血液标本的采集及动物处死方法
　第2章 细胞计数及活性测定
　　实验三 细胞计数的方法
　　实验四 细胞活力测定
　第3章 细胞培养
　　实验五 细胞培养用器材的准备与无菌操作
　　实验六 原代细胞培养
　　实验七 细胞传代培养
　　实验八 细胞的冻存与复苏
　第4章 动物模型的建立
　　实验九 免疫功能低下动物模型
　　实验十 移植性肿瘤动物模型
　第5章　　实验动物给药方法
　　实验十一　实验动物的捉持与固定
　　实验十二　实验动物的给药方法
　第6章 目的基因的克隆与表达
　　实验十三 RT-PCR扩增小鼠IL-2基因
　　实验十四 小鼠IL-2原核表达质粒的构建
　　实验十五 重组mIL-2的诱导表达及SDS-PAGE鉴定
　　实验十六 重组mIL-2的亲合层析纯化及浓度测定
第二篇 经典验证性实验
　第7章 凝集反应
　　实验十七 玻片凝集试验
　　实验十八 试管凝集试验
　　实验十九 间接凝集试验
　　实验二十 协同凝集试验
　第8章 沉淀反应
　　实验二十一 单向琼脂扩散
　　实验二十二 双向琼脂扩散
　　实验二十三 对流免疫电泳
　　实验二十四 免疫电泳
　　实验二十五 火箭免疫电泳
　　实验二十六 交叉免疫电泳
　　实验二十七 免疫比浊
　第9章 补体参与的免疫反应
　　实验二十八 溶血试验
　　实验二十九 血清总补体活性测定
　　实验三十 补体依赖的细胞毒试验
　第lO章 免疫标记技术
　　实验三十一 酶联免疫吸附试验
　　实验三十二 酶联免疫斑点(EILISPOT)技术检测淋巴细胞分泌活性
　　实验三十三 间接免疫荧光法检测人外周血T细胞亚群
　　实验三十四 胶体金的制备
　　实验三十五 免疫金的制备
　　实验三十六 胶体金斑点层析技术检测早期妊娠
　　实验三十七 中性粒细胞吞噬功能的化学发光测定
　1章 免疫细胞的分离纯化
　　实验三十八 沉降法分离外周血白细胞
　　实验三十九 密度梯度离心法分离外周血单个核细胞
　　实验四十 小鼠脾细胞的制备
　　实验四十一 小鼠胸腺细胞的制备
　　实验四十二 小鼠骨髓树突状细胞的制备
　　实验四十三 小鼠腹腔巨噬细胞的制备
　2章 吞噬细胞功能测定
　　实验四十四 硝基四氮唑蓝还原试验
　　实验四十五 细菌计数法测定中性粒细胞吞噬功能
　　实验四十六 巨噬细胞吞噬功能测定
　　实验四十七 中性粒细胞趋化功能测定
　3章 超敏反应
　　实验四十八 豚鼠过敏反应
　　实验四十九 皮肤速发型超敏反应
　　实验五十 血清总IgE测定
　　实验五十一 特异性IgE的测定
第三篇 综合性实验
　4章 多克隆抗体的制备
　　实验五十二 免疫血清的制备
　　实验五十三 免疫血清的鉴定与纯化
　5章 单克隆抗体的制备
　　实验五十四 动物的选择与免疫
　　实验五十五 细胞融合
　　实验五十六 杂交瘤的筛选与克隆
　　实验五十七 单克隆抗体的制备与鉴定
　　实验五十八 单克隆抗体Fab片段的制备
　6章 免疫印迹
　　实验五十九 免疫印迹技术
　7章 免疫细胞检测
　　实验六十 溶血空斑试验
　　实验六十一 APAAP桥联酶标法检测T细胞亚群
　　实验六十二 流式细胞术检测T细胞亚群
　8章 免疫细胞功能检测
　　实验六十三 淋巴细胞增殖试验
　　实验六十四 混合淋巴细胞反应
买验六十五 NK细胞活性测定
　　实验六十六 细胞毒性T淋巴细胞活性测定
　9章 细胞因子的检测
　　实验六十七 白细胞介素-2活性的检测
　　实验六十八 肿瘤坏死因子的生物学活性检测
　第20章 细胞凋亡的检测
　　实验六十九 凝胶电泳法检测小鼠胸腺细胞凋亡
　　实验七十 末端脱氧核糖核苷酸转移酶介导的缺口末端标记法检测细胞凋亡
　　实验七十一 流式细胞术检测细胞凋亡
第四篇 临床免疫实验
　第21章 感染性疾病的免疫学检测
　　实验七十二 IgM捕获法检测TORCH感染特异性IgM抗体
　　实验七十三 双抗原夹心ELISA法检测人类免疫缺陷病毒抗体
　　实验七十四 ELISA法检测乙型肝炎病毒抗原及特异性抗体
买验七十五 IgM捕获法检测甲型肝炎病毒特异性IgM抗体
　第22章 肿瘤标志物的检测
买验七十六 微粒子化学发光免疫法检测甲胎蛋白
　　实验七十七 微粒子化学发光免疫法检测癌胚抗原
买验七十八 微粒子化学发光免疫法检测其他肿瘤相关抗原
　第23章 自身免疫性疾病的检测
买验七十九 斑点酶免疫法检测抗ENA抗体
买验八十 ELISA检测抗甲状腺球蛋白抗体
　第24章 内分泌疾病的免疫学检测
　　实验八十一 电化学发光免疫法检测甲状腺激素
　　实验八十二 电化学发光免疫法检测雌二醇
　第25章 血液药物浓度的检测
　　实验八十三 荧光偏振免疫法测定血液环孢素浓度
　　实验八十四 荧光偏振免疫法测定血液卡马西平浓度
　　实验八十五 微粒子酶免分析法测定血液地高辛浓度
第五篇 创新性实验
　第26章　　实验的选题、设计、实施与总结
　第27章 创新性实验参考选题
附录1 常用实验仪器设备简介
附录2 常用试剂配制

作者介绍

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文摘

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序言

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现代免疫学研究方法与实践 第一部分：免疫系统的基础回顾与实验设计 本部分旨在为读者搭建扎实的理论基础，为后续的实验操作做好铺垫。我们将首先回顾免疫系统的基本组成、关键细胞及其功能，包括但不限于T细胞、B细胞、巨噬细胞、树突状细胞等，以及它们在先天免疫和适应性免疫中的协同作用。我们将深入探讨免疫应答的几个核心环节，如抗原提呈、淋巴细胞的活化与分化、效应分子的产生以及免疫记忆的形成。同时，本部分还将引导读者理解免疫系统在维持机体稳态、抵御病原体入侵以及识别并清除异常细胞（如肿瘤细胞）中的重要作用。 在理论基础之上，我们将重点讲解科学的实验设计原则。这包括如何提出一个具有研究价值的科学问题，如何将问题转化为可操作的实验假设，以及如何根据假设设计严谨的实验方案。我们将详细阐述对照组、实验组的设置，变量的控制，以及样本量的选择等关键要素。此外，还将强调实验结果的统计学分析方法，包括常用统计检验的选择与解读，以及如何有效地呈现和解释实验数据，以确保研究结论的科学性和可靠性。这一部分的学习将帮助读者提升独立思考和解决问题的能力，为开展高质量的免疫学研究奠定坚实基础。 第二部分：免疫学核心实验技术详解 本部分将聚焦于免疫学研究中最常用、最核心的实验技术，并提供详尽的操作指南和原理说明。 细胞培养技术： 无菌操作技术： 严格遵循无菌操作规程是所有细胞培养实验成功的基石。我们将详细介绍超净工作台的使用、试剂和器具的灭菌方法、培养基的准备与更换、以及污染的预防与处理。 原代细胞分离与培养： 学习如何从血液、淋巴组织（如脾脏、淋巴结）或骨髓中分离出特定的免疫细胞群。包括密度梯度离心法、磁珠分选法（如MACS、FACS）等。我们将详细介绍不同细胞类型（如淋巴细胞、单核细胞、粒细胞）的分离原理和操作步骤，以及优化培养条件以维持细胞活性和功能。 细胞系培养： 介绍常用免疫细胞系（如HeLa、Jurkat、RAW 264.7等）的培养、传代、冻存和复苏技术。强调不同细胞系对培养基、温度、CO2浓度等环境的要求，以及如何维持细胞系的纯度和遗传稳定性。 细胞功能检测： 介绍如何通过培养过程中的检测来评估细胞活力（如MTT法、CCK-8法）、增殖能力（如BrdU掺入法）、以及凋亡情况（如Annexin V/PI染色法）。 免疫化学与分子生物学技术： 抗原制备与鉴定： 学习如何制备和纯化重组蛋白、多肽抗原，以及如何通过SDS-PAGE、Western Blot等方法鉴定抗原的纯度和分子量。 抗体制备与鉴定： 详细介绍单克隆抗体和多克隆抗体的制备原理，包括动物免疫、杂交瘤技术、抗体纯化等。同时，将介绍抗体效价测定、特异性鉴定等方法，确保抗体用于后续实验的有效性。 Western Blotting（免疫印迹）： 作为检测特定蛋白质表达的经典技术，我们将详细介绍其操作流程：样本制备（总蛋白提取、膜蛋白提取）、SDS-PAGE电泳分离、转膜（PVDF膜、NC膜）、封闭、一抗孵育、二抗孵育、显色检测。同时，还将介绍如何进行定量分析。 ELISA（酶联免疫吸附测定）： 介绍ELISA的基本原理，包括竞争法、间接法、双抗体夹心法等。详细讲解其在检测抗体、抗原、细胞因子等方面的应用，以及实验流程、结果判读与注意事项。 流式细胞术（Flow Cytometry, FC）： 深入阐述流式细胞术在单细胞水平分析细胞表面标志物、胞内分子以及细胞物理特性（如大小、颗粒度）的原理。详细介绍抗体标记（荧光染料选择）、上样、仪器操作、数据采集与分析（如门控策略、直方图、散点图解读）。重点介绍其在免疫细胞鉴定、分选、增殖、凋亡、细胞周期等方面的应用。 免疫荧光染色（Immunofluorescence, IF）： 介绍IF技术在可视化细胞内或细胞表面特定蛋白表达的原理。详细讲解样本制备（细胞爬片、组织切片）、固定、透化、一抗、二抗孵育、荧光显微镜观察与图像分析。 PCR（聚合酶链式反应）与RT-PCR（逆转录-PCR）： 学习RT-PCR在检测RNA表达水平的原理，包括RNA提取、cDNA合成、PCR扩增。详细介绍引物设计、PCR反应条件优化、结果分析（如凝胶电泳）。 qPCR（定量PCR）： 介绍qPCR在精确量化基因表达水平的优势，包括 SYBR Green法和TaqMan探针法。讲解反应体系构建、标准曲线绘制、数据分析与结果解读。 第三部分：免疫学功能性实验与应用 本部分将重点介绍如何利用已掌握的实验技术去深入研究免疫系统的功能，以及这些技术在实际应用中的价值。 细胞因子检测与调控： 细胞因子检测： 介绍利用ELISA、流式细胞术（胞内染色）、Luminex平台等方法检测细胞因子（如IL-2, IL-4, IFN-γ, TNF-α等）的表达水平，以评估免疫细胞的功能状态。 细胞因子对免疫细胞功能的影响： 设计实验研究不同细胞因子对淋巴细胞增殖、分化、凋亡以及分泌其他细胞因子的影响。 细胞因子在疾病中的作用： 探讨细胞因子在炎症、感染、自身免疫病、肿瘤等疾病发生发展中的作用机制，并设计相应的实验进行验证。 细胞毒性免疫研究： 细胞杀伤实验： 介绍如何利用51Cr释放法、LDH释放法、GFP/RFP标记靶细胞法等技术评估细胞毒性T淋巴细胞（CTLs）和自然杀伤细胞（NK cells）的杀伤活性。 细胞死亡机制研究： 结合流式细胞术（Annexin V/PI染色）、Western Blot（caspase激活）、TUNEL染色等技术，研究细胞死亡的通路和机制。 抗体功能研究： 抗体介导的细胞毒性（ADCC）： 设计实验检测抗体诱导NK细胞或其他效应细胞杀伤靶细胞的能力。 补体依赖性细胞毒性（CDC）： 介绍如何通过检测补体激活和靶细胞裂解来评估抗体介导的CDC活性。 疫苗研发与免疫应答评价： 动物模型建立： 介绍不同疾病模型（如感染模型、肿瘤模型、自身免疫病模型）的建立与应用。 抗体滴度检测： 利用ELISA等方法检测动物体内针对特定抗原产生的抗体水平，评估疫苗的免疫原性。 细胞免疫应答评估： 通过流式细胞术、IFN-γ ELISpot等方法检测疫苗诱导的T细胞应答。 保护性免疫研究： 评估疫苗接种后动物对病原体攻击的抵抗能力。 免疫抑制与免疫激活研究： 免疫检查点分子研究： 利用流式细胞术、Western Blot等技术检测PD-1, CTLA-4等免疫检查点分子的表达，并设计实验研究其在肿瘤免疫逃逸中的作用。 免疫激活药物的评估： 设计实验评估新型免疫激活剂对免疫细胞功能的影响。 第四部分：数据分析、报告撰写与伦理考量 本部分将指导读者如何系统地整理、分析实验数据，并将其有效地呈现出来。 数据管理与整理： 强调规范记录实验过程、原始数据的重要性，以及如何利用电子表格和专业统计软件进行数据管理。 统计学分析进阶： 深入讲解t检验、方差分析（ANOVA）、卡方检验、相关性分析等常用统计方法的适用条件、操作步骤以及结果解读。 图表制作与数据可视化： 介绍如何利用GraphPad Prism, R语言等工具制作科学、清晰的图表（如柱状图、折线图、散点图、箱线图等），以直观地展示实验结果。 实验报告撰写规范： 详细讲解科研论文的结构，包括题目、摘要、引言、材料与方法、结果、讨论、参考文献等各部分的撰写要点，以及如何清晰、准确地描述实验过程、展示数据和阐述研究结论。 学术诚信与伦理规范： 强调科研中的学术诚信原则，包括数据造假、剽窃等行为的危害。介绍实验动物使用伦理、生物安全等相关法规与规范。 通过对以上各部分的深入学习和实践，读者将能够系统地掌握现代免疫学研究的核心理论与实验技术，能够独立设计和开展免疫学研究课题，并具备解读和分析实验结果的能力，为未来在免疫学领域的学习、研究或工作打下坚实的基础。

评分☆☆☆☆☆

这本书的参考价值，从其引用的文献和案例中就能窥见一斑。它显然是建立在扎实的、前沿的科学文献基础之上的，这保证了其内容的权威性和时效性。更让我惊喜的是，它并未完全沉溺于纯理论的堆砌，而是非常巧妙地穿插了大量的“经典案例回顾”和“前沿技术展望”。通过对历史上的关键实验的重述，比如解释某个重要发现是如何通过特定的实验设计实现的，不仅丰富了读者的知识广度，也拓宽了实验思路。而在展望部分，作者对新兴的单细胞测序技术在免疫学中的应用趋势分析得鞭辟入里，既肯定了技术的潜力，也客观指出了当前面临的挑战，这使得这本书不仅仅是一本回顾过去的操作手册，更是一扇通往未来免疫学研究方向的窗口。这种将历史、现状与未来融合的叙事手法，极大地激发了我对深入研究的渴望和对学科发展的信心。

评分☆☆☆☆☆

我一直认为一本好的实验指导书，其价值不仅仅在于传授“如何做”，更在于教会读者“如何思考”和“如何解决问题”。这本书在这方面做得尤为出色，体现了一种资深科研工作者的视角。它并没有给出“标准答案式”的操作指南，而是包含了大量的“变通和优化”的经验之谈。例如，在探讨ELISA实验时，它不仅详细说明了包被、封闭、检测的标准流程，还专门辟出一个小节，深入分析了孔底孵育时间、抗体稀释比对结果准确性的影响，并探讨了在样本浓度过高或过低时，应该采取哪些预处理或稀释策略。这种对实验细节的深度挖掘和对潜在误差来源的预警，远超出了普通教材的范畴，更像是一位经验丰富的导师在耳边细细叮嘱。阅读这些内容时，我能真切地感受到作者对实验科学严谨性的极致追求，它培养的不是单纯的“操作员”，而是能够独立思考实验设计的“研究者”。

评分☆☆☆☆☆

从一个实际使用者的角度来看，这本书在可操作性和实用性上达到了一个很高的平衡点。它的语言风格是那种典型的学术写作，精准、客观，几乎没有一句废话，但奇怪的是，我却丝毫没有感到枯燥。这得益于其条理清晰的章节结构和对关键步骤的反复强调。每完成一个技术模块的学习，书后附带的“自测与反思”环节就显得尤为重要，它迫使读者回顾刚刚学到的知识点，并思考其在实际操作中可能遇到的问题，这种主动学习的机制非常高效。而且，书中的一些插图和图表设计，即便是作为辅助材料，也充满了信息密度，比如那些关于不同免疫细胞分选的荧光通道设置表格，直接就能拿来作为实验准备的参考清单。总而言之，它不是那种只适合在图书馆里翻阅的“大部头”，而是真正能够被带进实验室，被试剂和仪器打扰、被实验数据检验的“工作伴侣”。它的价值，在实际操作中才会愈发显现。

评分☆☆☆☆☆

这本书的装帧设计着实让人眼前一亮，那种沉稳中又不失细节的质感，初次上手时便带来一种对知识的敬畏感。内页的纸张选择也相当考究，光洁度适中，即便是长时间的阅读，眼睛也不会感到过分疲劳。我特别欣赏它在图文排版上的用心，那些复杂的分子结构图和实验流程示意图，都被处理得清晰明了，线条的粗细和色彩的搭配都经过了深思熟虑，有效地降低了初学者理解抽象概念的门槛。比如，在介绍细胞因子信号通路的那一章，作者没有采用堆砌文字的方式，而是巧妙地用流程图将各个关键蛋白的激活与抑制关系可视化，这对于我这种更偏爱视觉学习的人来说，简直是福音。而且，书中的一些历史背景介绍，穿插得恰到好处，让原本枯燥的实验技术在历史的沉淀下显得更有厚重感，仿佛在诉说着免疫学领域前辈们探索的艰辛与智慧。整体来说，这本书从触感到视觉，都传递出一种专业、严谨且充满诚意的态度，让人愿意沉浸其中，细细品味每一个知识点。

评分☆☆☆☆☆

这本书的内容编排逻辑性之强，简直是教科书级别的典范。它不是简单地罗列知识点，而是构建了一个层层递进的知识体系框架。开篇的理论基础部分，像是为后面的实验操作打下了坚实的理论地基，每一章的过渡都衔接得天衣无缝，从宏观的免疫系统概述，自然而然地过渡到微观的细胞相互作用机制，再到具体的分子检测方法，节奏掌握得极为精准。我过去在学习类似主题时，常常因为理论和实践的脱节感到困惑，但这本书成功地将“为什么这么做”和“如何操作”紧密地结合在了一起。每当介绍一个核心实验技术时，作者都会先用一段话点明其背后的生物学原理，然后立刻跟进详细的步骤分解，这极大地增强了学习的连贯性和目的性。即便是那些公认难度较高的技术，如流式细胞术的数据分析部分，也被拆解成了易于消化的步骤，配上详尽的注意事项，让人感觉即便是第一次接触，也能心中有数，避免走弯路。